高效液相色谱ppt课件.ppt

变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分仪仪 器器 分分 析析INSTRUMENTAL ANALYSIS 教教 师：师： 谢谢 宝宝 平平变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分液相色谱法液相色谱法LC 以液体为流动相的色谱法称为液相色谱法以液体为流动相的色谱法称为液相色谱法Liquid Chromatography变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分3 按分离机制按分离机制液相色谱法类型液相色谱法类型p 吸附色谱p 分配色谱p 离子交换色谱p 空间排阻色谱变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分 按操作形式按操作形式液相色谱法类型液相色谱法类型纸色谱纸色谱 薄层色谱薄层色谱 薄膜色谱薄膜色谱变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分 按分离效能按分离效能经典液相色谱经典液相色谱现代液相色谱现代液相色谱液相色谱法类型液相色谱法类型经典液相色谱经典液相色谱: 常压下靠重力或毛细作用输送流动相的色谱方法经典柱色谱法经典柱色谱法平面色谱法平面色谱法现代液相色谱现代液相色谱: 高压输液泵输送流动相高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分高效液相色谱法高效液相色谱法 High Performance Liquid Chromatography变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分第一节、概述第一节、概述 高效液相色谱（高效液相色谱（HPLC）：）： 高效能固体细微粒为固定相高效能固体细微粒为固定相 高压输送流动相高压输送流动相 高灵敏度检测器高灵敏度检测器一、含义一、含义变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分二、高效液相色谱与其它色谱方法的比较二、高效液相色谱与其它色谱方法的比较1. HPLC与经典与经典LC的比较的比较经典经典LCHPLC固定相颗粒固定相颗粒100m, ,不均匀不均匀 固定相颗粒固定相颗粒uopt, B/U较小较小可忽略可忽略 即：即：H = A + C u一、一、HPLC中的速率理论中的速率理论 2、纵向扩散：、纵向扩散：B=2 Dm 称为弯曲因子，固定相对分子扩散阻碍情况称为弯曲因子，固定相对分子扩散阻碍情况D Dm m组分在流动相中的扩散系数组分在流动相中的扩散系数变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分CuuBAH一、一、HPLC中的速率理论中的速率理论3、传质阻力：、传质阻力：D Dm m：流动相扩散系数；：流动相扩散系数；D Ds s：固定相扩散系数；：固定相扩散系数；D Dp p：填充物平均粒径；填充物平均粒径；d df f：液膜厚度；液膜厚度； ：填充物填充情况决定的因子：填充物填充情况决定的因子静态流动相传质阻力；：流动相传质阻力；：固定相传质阻力；： smmCCCssfsmpsmmsDdDdCCCC22smm)(p 化学健合相固定相化学健合相固定相df小，小，Cs可忽略可忽略p 降低降低dP: 细颗粒固定相细颗粒固定相p 增加增加Dm: 选择低黏度流动相，如甲醇，乙腈等选择低黏度流动相，如甲醇，乙腈等变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分CuuBAH一、一、HPLC中的速率理论中的速率理论4、流动相流速：、流动相流速：uCuCAHsmmp u提高提高，柱效，柱效下降下降p HPLC流速不宜过快，一般为流速不宜过快，一般为1 ml/min左右左右变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分一、一、HPLC中的速率理论中的速率理论p HPLC柱效的最主要影响因素：柱效的最主要影响因素：固定相颗粒粒度固定相颗粒粒度dPp 小的小的dP是保证柱效的主要措施是保证柱效的主要措施p HPLC实验条件：实验条件： 小粒度、均匀的球形化学健合相；小粒度、均匀的球形化学健合相； 低黏度流动相，流速不宜快；低黏度流动相，流速不宜快； 柱温适当柱温适当根据根据HPLC中的速率理论中的速率理论变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分第五节第五节 HPLC分离条件的选择分离条件的选择二、二、HPLC中分离条件的选择中分离条件的选择以反相键合相色谱法的分离条件为例以反相键合相色谱法的分离条件为例变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分（1）固定相：）固定相：反相健合相色谱法的分离条件反相健合相色谱法的分离条件 常常采用非极性或极性较小的键合固定相，采用非极性或极性较小的键合固定相，如十八烷基键合相如十八烷基键合相ODS、辛烷基键合相、苯基、辛烷基键合相、苯基键合相等。键合相等。变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分（2）流动相：）流动相：反相健合相色谱法的分离条件反相健合相色谱法的分离条件 常采用极性最强的水为基础溶剂，加入常采用极性最强的水为基础溶剂，加入黏度低的甲醇、乙腈等极性调节剂。黏度低的甲醇、乙腈等极性调节剂。增加极性调节剂的比例，洗脱能力增大。增加极性调节剂的比例，洗脱能力增大。加入抑制剂如弱酸碱抑制溶质解离，洗脱能力下降。加入抑制剂如弱酸碱抑制溶质解离，洗脱能力下降。变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分（3）流速：）流速：反相健合相色谱法的分离条件反相健合相色谱法的分离条件 在固定相和流动相确定后，降低流动相的在固定相和流动相确定后，降低流动相的流速可以提高柱效。流速可以提高柱效。 HPLC流速不宜过快，一般为流速不宜过快，一般为1 ml/min左右。左右。变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分（4）柱温：）柱温：一般在室温下进行一般在室温下进行柱温柱温降低流动相粘度降低流动相粘度减少传质阻力减少传质阻力 分辨率降低，柱寿命短，易产生气泡分辨率降低，柱寿命短，易产生气泡反相健合相色谱法的分离条件反相健合相色谱法的分离条件变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分第六节第六节 HPLC的建立与应用的建立与应用一、建立一、建立HPLC分析方法的一般步骤分析方法的一般步骤 1、根据被分析样品的特性选择适用于、根据被分析样品的特性选择适用于样品分析的一种样品分析的一种HPLC分离方式。分离方式。p材料来源、浓度范围材料来源、浓度范围p组分特性、结构、分子量、溶解性等组分特性、结构、分子量、溶解性等变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分一、建立一、建立HPLC分析方法的一般步骤分析方法的一般步骤 变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分一、建立一、建立HPLC分析方法的一般步骤分析方法的一般步骤 2、选择、选择合适的分析方法合适的分析方法p适用的色谱柱：适用的色谱柱：柱的规格（柱内径及柱的规格（柱内径及柱长）和选用固定相（粒径及孔径）柱长）和选用固定相（粒径及孔径）p流动相流动相p检测器检测器p样品预处理样品预处理变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分一、建立一、建立HPLC分析方法的一般步骤分析方法的一般步骤 3.分析条件的优化分析条件的优化p流动相种类与配比流动相种类与配比p梯度梯度p温度温度p流速流速p检测波长检测波长p进样量进样量变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分一、建立一、建立HPLC分析方法的一般步骤分析方法的一般步骤 4、由获得的色谱图进行定性分析和定、由获得的色谱图进行定性分析和定量分析。量分析。变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分二、二、HPLC定性定量分析方法定性定量分析方法1 1、定性分析、定性分析色谱鉴定法：色谱鉴定法：保留时间对照保留时间对照化学鉴定法：化学鉴定法：利用专属化学反应对分离利用专属化学反应对分离 后收集的组分定性后收集的组分定性色谱色谱-光谱联用定性光谱联用定性 非在线色谱光谱联用法：非在线色谱光谱联用法： 色谱光谱联用仪色谱光谱联用仪变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分二、二、HPLC定性定量分析方法定性定量分析方法2 2、定量分析、定量分析归一化法：归一化法： 定量结果与进样量无关，定量结果与进样量无关，需知道校正因子需知道校正因子。外标法：外标法：外标工作曲线法、外标对照法外标工作曲线法、外标对照法 不需知道校正因子，但需进样量准确不需知道校正因子，但需进样量准确内标法：内标法：内标工作曲线法、内标对照法内标工作曲线法、内标对照法 定量结果与进样量无关，不需知道校正因子定量结果与进样量无关，不需知道校正因子变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分1、在食品分析中的应用、在食品分析中的应用p食品营养成分分析：食品营养成分分析：蛋白质、氨基酸、糖类、蛋白质、氨基酸、糖类、色素、维生素、香料、矿物质等；色素、维生素、香料、矿物质等；p食品添加剂分析：食品添加剂分析：甜味剂、防腐剂、着色剂、甜味剂、防腐剂、着色剂、抗氧化剂等；抗氧化剂等；p食品污染物分析：食品污染物分析：霉菌毒素、微量元素、多霉菌毒素、微量元素、多环芳烃等。环芳烃等。 2、在环境分析中的应用、在环境分析中的应用 多环芳烃、农药（如氨基甲酸脂类）残留等。多环芳烃、农药（如氨基甲酸脂类）残留等。三、三、HPLC的应用的应用变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分3、在生命科学中的应用、在生命科学中的应用 分子水平上研究生命科学、遗传工程、临分子水平上研究生命科学、遗传工程、临床化学、分子生物学等必不可少的工具床化学、分子生物学等必不可少的工具p低分子量物质：氨基酸、有机酸、有机胺、低分子量物质：氨基酸、有机酸、有机胺、类固醇、卟啉、糖类、维生素等分离和测定类固醇、卟啉、糖类、维生素等分离和测定p高分子量物质：多肽、核糖核酸、蛋白质和高分子量物质：多肽、核糖核酸、蛋白质和酶的纯化、分离和测定酶的纯化、分离和测定三、三、HPLC的应用的应用变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分4、在医学检验中的应用、在医学检验中的应用 体液中代谢物测定；药代动力学研究；临体液中代谢物测定；药代动力学研究；临床药物监测：床药物监测：p合成药物：抗生素、抗忧郁药、黄胺类药等合成药物：抗生素、抗忧郁药、黄胺类药等p天然药物：生物碱（吲哚碱、强心甙）等天然药物：生物碱（吲哚碱、强心甙）等5、在无机分析中的应用、在无机分析中的应用 阳、阴离子的分析等。阳、阴离子的分析等。三、三、HPLC的应用的应用变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分我国药典收载我国药典收载HPLC法项目和数量比较表法项目和数量比较表项目项目数数 量量1985版版1990版版1995版版2000版版2010版版鉴别鉴别934150检查检查1240160含量含量测定测定7601173871385变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分色谱柱类型色谱柱类型 品种数品种数C18柱柱1210个个C8柱柱93个个氰基柱氰基柱21个个硅胶柱硅胶柱31个个苯基柱苯基柱9个个色谱柱类型色谱柱类型品种数品种数氨基柱氨基柱5个个丁基柱丁基柱3个个三甲基硅烷三甲基硅烷柱柱2个个二羟基丙基硅烷键合二羟基丙基硅烷键合硅胶硅胶柱柱1个个苯乙烯苯乙烯-二乙烯基二乙烯基柱柱1个个20102010版药典二部中色谱柱的使用情况版药典二部中色谱柱的使用情况变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分缬沙坦缬沙坦a-酸性糖蛋白柱酸性糖蛋白柱盐酸帕罗西汀盐酸帕罗西汀瑞格列奈瑞格列奈手性色谱柱手性色谱柱1酸性蛋白柱酸性蛋白柱瑞格列奈片瑞格列奈片苯磺酸顺阿曲库铵苯磺酸顺阿曲库铵手性色谱柱手性色谱柱chiralcel OD-RH注射用苯磺酸顺阿曲库铵注射用苯磺酸顺阿曲库铵甲氨蝶呤甲氨蝶呤牛血清白蛋白键合硅胶柱牛血清白蛋白键合硅胶柱甲氨蝶呤片甲氨蝶呤片注射用甲氨蝶呤注射用甲氨蝶呤变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分