动物细胞融合与单克隆抗体课件.ppt

关于动物细胞融合与单克隆抗体现在学习的是第1页，共24页提问：提问：哪种植物细胞工程技术可以突破不同生物之哪种植物细胞工程技术可以突破不同生物之间的生殖隔离障碍，培育出新的作物类型？间的生殖隔离障碍，培育出新的作物类型？植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术你能回忆出植物体细胞杂交的过程吗？你能回忆出植物体细胞杂交的过程吗？现在学习的是第2页，共24页植物体细胞杂交技术过程图植物体细胞杂交技术过程图现在学习的是第3页，共24页动物细胞融合动物细胞融合 动物细胞融合的过程动物细胞融合的过程请同学们阅读课本请同学们阅读课本P52P52动物细胞融合动物细胞融合现在学习的是第4页，共24页 动物细胞融合的概念动物细胞融合的概念 动物细胞融合也称细胞杂交，是指动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程过程动物细胞融合动物细胞融合融合后形成的融合后形成的单核单核细胞称为细胞称为杂交杂交细胞细胞现在学习的是第5页，共24页问题讨论问题讨论 2 2 2 2、动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？影响？3 3 3 3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？那动、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？那动、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？那动、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？那动物细胞融合呢？物细胞融合呢？物细胞融合呢？物细胞融合呢？、植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗融合后能形成杂种动物个体吗融合后能形成杂种动物个体吗融合后能形成杂种动物个体吗?4、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？什么原理？什么原理？5 5、为什么要用、为什么要用、为什么要用、为什么要用灭活灭活灭活灭活的病毒？的病毒？的病毒？的病毒？6 6、动物细胞融合有什么意义？、动物细胞融合有什么意义？、动物细胞融合有什么意义？、动物细胞融合有什么意义？现在学习的是第6页，共24页2 2、动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？或融合过程有什么影响？3 3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？法有哪些？离心、振动、电激等物理方法；离心、振动、电激等物理方法；PEGPEG等化学方法等化学方法问题讨论问题讨论动物细胞无细胞壁，动物细胞融合过程中不须动物细胞无细胞壁，动物细胞融合过程中不须去除细胞壁和再生出细胞壁。去除细胞壁和再生出细胞壁。、植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物、植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？细胞融合后能形成杂种动物个体吗？不能，只能得到杂交细胞不能，只能得到杂交细胞现在学习的是第7页，共24页4 4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？其他方法吗？能能 ，还可以利用灭活的病毒（生物方法）还可以利用灭活的病毒（生物方法）进行诱导进行诱导问题讨论问题讨论、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？理是否相同？相同，都是细胞膜的流动性相同，都是细胞膜的流动性现在学习的是第8页，共24页问题讨论问题讨论7 7、动物细胞融合有什么意义？、动物细胞融合有什么意义？6 6、为什么要用、为什么要用灭活灭活的病毒？的病毒？病毒一般对生物体是有伤害的。病毒一般对生物体是有伤害的。仙台病毒仙台病毒物理或物理或化学方法化学方法化学方法化学方法丧失感染活性丧失感染活性保留融合活性保留融合活性突破了有性杂交方法的局限，突破了有性杂交方法的局限，使远源杂交成为可能。使远源杂交成为可能。现在学习的是第9页，共24页有有何何同同？不不同同？动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合现在学习的是第10页，共24页主要用于制备主要用于制备单克隆抗体单克隆抗体获得杂种植株获得杂种植株物理、化学方法物理、化学方法（同左）（同左）灭活的病毒灭活的病毒物理（离心、振物理（离心、振荡、电激）荡、电激）化学（聚乙二醇）化学（聚乙二醇）使细胞分散后诱使细胞分散后诱导细胞融合导细胞融合去除细胞壁后诱去除细胞壁后诱导原生质体融合导原生质体融合细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性用途用途诱导方法诱导方法步骤步骤融合的原理融合的原理动物细胞融合动物细胞融合植物体细胞杂交植物体细胞杂交比较项目比较项目植物、动物细胞融合的比较植物、动物细胞融合的比较现在学习的是第11页，共24页1.1.抗体是由何种细胞产生的？抗体是由何种细胞产生的？2.2.2.2.抗体是如何产生的？抗体是如何产生的？单克隆抗体单克隆抗体现在学习的是第12页，共24页B淋巴细胞淋巴细胞动物在免疫过程中产生的抗体种类可达百万种动物在免疫过程中产生的抗体种类可达百万种每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体但是：但是：一个一个B淋巴细胞在体外不能无限增殖淋巴细胞在体外不能无限增殖.现在学习的是第13页，共24页产量少、纯度低、特异性差产量少、纯度低、特异性差单克隆抗体单克隆抗体、传统制备抗体的缺点是？如何、传统制备抗体的缺点是？如何改进改进？3 3、传统制备抗体的方法是？、传统制备抗体的方法是？现在学习的是第14页，共24页、如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？、如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？单克隆抗体单克隆抗体问题讨论问题讨论提示：提示：1.1.什么样的细胞可以产生抗体？什么样的细胞可以产生抗体？2.2.什么样的细胞可以无限增殖？什么样的细胞可以无限增殖？、瘤细胞和癌细胞有何区别？、瘤细胞和癌细胞有何区别？共同点：两者都有无限增殖的能力共同点：两者都有无限增殖的能力不同点：瘤细胞不能转移不同点：瘤细胞不能转移现在学习的是第15页，共24页 设计方案：设计方案：一个一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体淋巴细胞只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖杂种细胞杂种细胞单克隆抗体单克隆抗体现在学习的是第16页，共24页单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程 注射抗原注射抗原B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞细胞融合、细胞融合、筛选筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养筛选筛选，继续培养，继续培养足够数量的、能产生特定足够数量的、能产生特定抗体的细胞群抗体的细胞群体外培养体外培养注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔单克隆抗体单克隆抗体（选择性培养基）（选择性培养基）单克隆抗体单克隆抗体诱导其融合的诱导其融合的方法有哪些？方法有哪些？现在学习的是第17页，共24页B BB B瘤瘤 瘤瘤瘤瘤 瘤瘤、细胞融合后培养液中有几种细胞？、细胞融合后培养液中有几种细胞？筛选杂种细胞筛选杂种细胞思考：思考：杂交瘤细胞杂交瘤细胞、制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？、制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？细胞融合技术、细胞培养技术细胞融合技术、细胞培养技术现在学习的是第18页，共24页诊断疾病诊断疾病（识别作用，如（识别作用，如同位素标记单克隆抗体，同位素标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、心血管畸形可诊断肿瘤、心血管畸形等）等）单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用优点：优点：准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速用于治疗疾病和运载药物（用于治疗疾病和运载药物（主主要用于癌症治疗，也可运载药物，要用于癌症治疗，也可运载药物，如如“生物导弹生物导弹”）（导向作用，导向作用，作为载体，作为载体，生物导弹生物导弹=单克单克隆抗体隆抗体+药物，药物，治疗肿瘤）治疗肿瘤）（位置准确、疗效高、副作用小）（位置准确、疗效高、副作用小）（位置准确、疗效高、副作用小）（位置准确、疗效高、副作用小）现在学习的是第19页，共24页小结小结两个过程两个过程动物细胞培养过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程三个三个“一一”一个诱导细胞融合的新方法一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒灭活病毒一个新细胞一个新细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞一个优势一个优势单克隆抗体特异性单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势强、灵敏度高的优势单克隆抗体单克隆抗体现在学习的是第20页，共24页 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案2、该方案能达到预期效果吗？为什么？、该方案能达到预期效果吗？为什么？4、图中、图中B为为_过程，常用过程，常用_作为诱导剂，该细胞继作为诱导剂，该细胞继承承_的遗传特性，既能的遗传特性，既能_,又能又能_。1、该实验方案的目的是、该实验方案的目的是_3、A是从小鼠的脾脏中取得是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生该细胞能够产生_5、C过程指细胞培养，该过程包括过程指细胞培养，该过程包括_培养和培养和_培养两个阶段，其培养两个阶段，其中中_代以内的的细胞属于细胞株。代以内的的细胞属于细胞株。制备单克隆抗体制备单克隆抗体B细胞细胞抗体抗体细胞融合细胞融合灭活病毒灭活病毒双亲细胞双亲细胞分泌抗体分泌抗体无限增殖无限增殖原代原代传代传代50B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔AC现在学习的是第21页，共24页世界上第一只克隆羊世界上第一只克隆羊“多多莉莉”的培育过程如图所示，的培育过程如图所示，请据图回答：请据图回答：乙乙甲甲abcdef(1)图中的甲为苏格兰绵羊，图中的甲为苏格兰绵羊，乙为多莉羊。那么，乙为多莉羊。那么，a和和b是通是通过过_分裂形成的，其分裂形成的，其DNA含量是体细胞的含量是体细胞的 _ ；c肯定是肯定是_ 细胞，乙的遗细胞，乙的遗传性状与提供传性状与提供 _的绵羊的绵羊 一致一致.减数减数一半一半体体细胞核细胞核现在学习的是第22页，共24页乙乙甲甲abcdef(2)产生产生 甲和乙的过程分别是甲和乙的过程分别是和和（3）在形成乙是的过程中，需）在形成乙是的过程中，需要将要将d的细胞核取出，将的细胞核取出，将c细胞细胞核移入核移入d细胞内，此技术叫细胞内，此技术叫。所需的受体细胞大多采用。所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是动物卵细胞的原因是（4）绵羊的白）绵羊的白色对黑色为显色。若甲是白色色对黑色为显色。若甲是白色绵羊，要判断它是否纯合体，绵羊，要判断它是否纯合体，选用与它交配的绵羊最好是选用与它交配的绵羊最好是-有性生殖有性生殖克隆克隆核移植核移植卵细胞大，易于操作；卵细胞卵细胞大，易于操作；卵细胞具有继续分化的潜能具有继续分化的潜能。黑毛黑毛现在学习的是第23页，共24页感谢大家观看26.09.2022现在学习的是第24页，共24页