菌落总数的测定方法操作规程.doc
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1、食品中菌落总数的测定方法操作规程一、适用范围本标准规定了食品中菌落总数(Aerobic plate count)的测定方法。 本标准适用于食品中菌落总数的测定,实验采样方案按照GB4789.1-2016。二、编写依据GB4789.2-2016食品安全国家标准 食品微生物学检验菌落总数的测定三、术语和定义菌落总数:食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。四、内容1.设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:1 .1恒温培养箱:361,3011.2 冰箱:251.3 恒温水浴箱:4611.4 天平:
2、感量为0.1g1.5 均质器1.6 振荡器1.7 无菌吸管:1 mL(具0.01 mL 刻度)、10 mL(具0.1 mL 刻度)或微量移液器及吸头1.8 无菌锥形瓶:容量250 mL、500 mL1.9 无菌培养皿:直径90 mm1.10 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸1.11 放大镜或/和菌落计数器2.培养基和试剂:2.1 平板计数琼脂培养基:同GB 4789.15项下制法。 2.2 磷酸盐缓冲液:同GB 4789.15项下制法。 2.3 无菌生理盐水:同GB 4789.15项下制法。 2.4 30%碳酸钠溶液。2.5 1mol/L HCl。3.样品的稀释3.1固体和半固体样品:称
3、取25 g样品置盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000 r/min10000 r/min均质1 min2 min,或放入盛有225 mL稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min2 min,制成1:10的样品匀液。3.2液体样品:以无菌吸管吸取25 mL样品置盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10的样品匀液。3.3用1 mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1 mL,沿管壁缓慢注于盛有9 mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其
4、混合均匀,制成1:100的样品匀液。3.4按4.3操作程序,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次1 mL无菌吸管或吸头。3.5根据对样品污染状况的估计,选择2个3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释时,吸取1 mL样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。同时,分别吸取1 mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。3.6及时将15 mL20 mL冷却至46 的平板计数琼脂培养基(可放置于46 1 恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。4.培养4.1待琼脂凝固后,将平板翻转,36 1 培养48 h2 h。水产品30 1 培养72 h
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- 菌落 总数 测定 方法 操作规程
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