高效大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(共4页).doc
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1、精选优质文档-倾情为你奉上大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号:CSB-E04570r检测范围:1.56 pg/ml- 100 pg/ml最低检测限:0.39 pg/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的大鼠GM-CSF,且与其他相关蛋白无交叉反应。有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中GM-CSF含量。说明 l 试剂盒保存:-20(较长时间不用时);2-8(频繁使用时)。l 浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。 l 中、英文说明书可能会有不一致之处,
2、请以英文说明书为准。l 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗GM-CSF抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗GM-CSF抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的GM-CSF呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板(Assay plate ): 一块(96孔)。 2. 标准品(Standard): 2瓶(冻干品)
3、。3. 样品稀释液(Sample Diluent): 120ml/瓶。4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent): 110ml/瓶。5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent): 110ml/瓶。6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody): 1120l/瓶(1:100)。7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin): 1120l/瓶(1:100)。8. 底物溶液(TMB Substrate): 110ml/瓶。 9. 浓洗涤液(Wash Buffer): 120ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10
4、. 终止液(Stop Solution): 110ml/瓶(2N H2SO4)。需要而未提供的试剂和器材1. 标准规格酶标仪2. 高速离心机3. 电热恒温培养箱4. 干净的试管和Eppendof管5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器6.蒸馏水,容量瓶等标本的采集及保存 1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20或-80保存,但应避免反复冻融。2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8 C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20或-80保存,但应避免反
5、复冻融。3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20或-80保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。最后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 pg/ml,,做系列倍比稀释后,分别稀释100
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- 高效 大鼠 粒细胞 巨噬细胞 集落刺激因子
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