血清总胆红素TBIL测定作业指导书.doc
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1、血血清清总总胆胆红红素素 T TB BI IL L 测测定定作业指导书作业指导书 1 1. . 实实验验原原理理 血清中的胆红素分为直接(结合)胆红素和间接 (未结合)胆红素。大多数方法是在1883 年 Ehrlich 提出的重氮法胆红素测量法 1,一些改良的方 法已被用来增进反应。这些改良的方法是使直接胆红素 直接和重氮化合物进行反应,生成一种有颜色的化合物, 而间接胆红素需要一种溶剂,如表面活性剂后才能进行 反应。 申能总胆红素试剂是改良的重氮法。使用一种稳定 的重氮盐, 2,4-二氯苯胺重氮盐( DCA) ,与胆红素反 应,形成红色偶氮化合物,它在540nm 吸光度最大。 在 540/6
2、00nm 时的吸光度与标本中总胆红素的浓度成正 比。 胆红素 +DCA 红色偶氮化合物 表面活性剂 2 2. . 标标本本: 2.1 病人准备:无特殊要求。最好用禁食的标本以减少 乳糜血的干扰。 2.2 类型:血清、肝素或EDTA 血浆,应避光保存。 3 3. . 标标本本存存放放: 1525保存可稳定 2 天;28保存可 稳定 7 天;-20保存可稳定 3 个月,如冰冻保存,不可反 复冻融!。 4 4. . 标标本本运运输输: 常温条件下避光保存运输。 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准: 标本溶血、细菌污染、脂血、非避 光保存运输的标本。 6 6. . 实实验验材材料料 6.1 试剂:
3、申能总胆红素试剂盒(141 0817170 1 试剂 1试剂 2) 6.1.1 试剂组成 试剂 1:664 ml 磷酸缓冲液 40mmol/L 氯化钠 9g/L 表面活性剂 ,稳定剂 适量 试剂 2:616 ml 2,4-二氯苯胺重氮盐 1mmol/L 盐酸 30mmol/L 表面活性剂 适量 6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存 试剂避光保存于 28,若无污染,可稳定至失 效期。试剂有效期为18 个月。试剂 2 必需避光保存。 试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染, 不能继续使用。 6.1.5 注意事项:此试剂为体外诊断用,不要入
4、口,毒 性还末确定;警告!腐蚀剂!不要入口;避免和眼睛, 皮肤或衣服接触,如果接触到,立即用大量的水冲洗受 损害的部位 15 分钟,接触到眼睛或吞服,立即寻找医 疗保护。 6.2 校准品:使用 DiaSys 公司提供的 TruCal U 校准 品对自动分析仪进行校准,参见生化检验校准品和质控 品.SOP 文件 6.3 质控品:参见生化检验校准品和质控品.SOP 文 件 7 7. . 仪仪器器:奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯AU1000 生化分析仪项目测定参数 .SOP 文件。 8.2 仪器操作步骤:参见生化检验奥林
5、巴斯AU1000 生化分析仪操作规程 .SOP 文件。 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制: 在每一批标本中都应把非定值血清水 平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析,以2S 为质控 警告限, 3S 为失控限,绘制质控图,判断是否在控。 质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法: 以 TruCal U 复合校准品校准仪器后, 在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结 果无需手工计算,以mol/L 报告。手工测定计算方 法为: Au 总胆红素 (mol/L) = 校准液浓度 As
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