常用pH缓冲液配置方法及注意事项.doc
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1、常用pH缓冲溶液的配制和pH值序号溶液名称配制方法pH值1氯化钾-盐酸13。0 ml 0。2 mol/L HCl 与25。0 ml 0。2 mol/L KCl混合均匀后,加水稀释至100 ml1。72氨基乙酸-盐酸在500 ml 水中溶解氨基乙酸150 g,加480 ml浓盐酸,再加水稀释至1L2.33一氯乙酸-氢氧化钠在200 ml 水中溶解2 g 一氯乙酸后,加40 g NaOH,溶解完全后再加水稀释至1 L2.84邻苯二甲酸氢钾-盐酸把25.0 ml 0。2 mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与6。0 ml 0。1 mol/L HCl混合均匀,加水稀释至100 ml3.65邻苯二甲酸氢钾氢氧
2、化钠把25.0 ml 0。2 mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与17。5 ml 0。1 mol/L NaOH混合均匀,加水稀释至100 ml4。86六亚甲基四胺-盐酸在200 ml水中溶解六亚甲基四胺40 g,加浓HCl 10 ml,再加水稀释至1 L5.47磷酸二氢钾氢氧化钠把25。0 ml 0.2 mol/L的磷酸二氢钾与23.6 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀,加水稀释至100 ml6.88硼酸-氯化钾-氢氧化钠把25.0 ml 0。2 mol/L的硼酸-氯化钾与4。0 ml 0。1 mol/L NaOH 混合均匀,加水稀释至100 ml8。09氯化铵氨水把0.1 mol/L
3、氯化铵与0.1 mol/L 氨水以2:1比例混合均匀9。110硼酸氯化钾-氢氧化钠把25。0 ml 0。2 mol/L 的硼酸氯化钾与43。9 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀,加水稀释至100 ml10.011氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠把 49.0 ml 0.1 mol/L 氨基乙酸氯化钠与51.0 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀11。612磷酸氢二钠氢氧化钠把 50。0 ml 0.05 mol/L Na2HPO4与26.9 ml 0。1 mol/L NaOH 混合均匀,加水稀释至100 ml12.013氯化钾氢氧化钠把 25.0 ml 0。2 mol/L KCl与66
4、.0 ml 0。2 mol/L NaOH混合均匀,加水稀释至100 ml13。0一、常用溶液的配制(一)溶液配制注意事项1药品要有较好的质量 试剂分为优级纯(保证试剂,Guaranteed reagent,GR)、分析试剂(Antalytical reagent,AR)化学纯(Chemical pure,CP)和实验试剂(Laboratory reagent,LR)等等。工业用的化学试剂,杂质较多,只在个别情况下应用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等.2药品称量要精确。3配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水,比电阻值在50万欧姆以上,pH在5.57.0之间才可应用,在组织培养等特殊用途
5、时应注意此项要求,配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水.配好后的溶液,应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质),以防杂菌生长。(二)0.067(1/15)Mol/L磷酸缓冲液11/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制:称取磷酸二氢钾(KH2PO4,AR)9。08g,用蒸馏水溶解后,倾入1000ml容量瓶内,再稀释至刻度(1000ml)。21/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制:称取无水磷酸氢二钠(Na2HPO4,A。R.)9。47g(或者Na2HPO42H2O 11.87g)用蒸馏水溶解后,放入1000ml容量瓶内,再加蒸馏水稀释至刻度(1000ml)。3按附表的比例,配制成不同p
6、H值的缓冲溶液。附表1 磷酸盐缓冲液配制法(单位:毫升)pH1/15Mol/L Na2HPO41/15Mol/L KH2PO4pH1/15Mol/L Na2HPO41/15Mol/L KH2PO45.88.092.07.166。623。45。99.990.17.272.028。06.012。287.87。376。823.26.115.384。77。380。819.26。218.681。47.584.115.96。322.477.67.687.013。06.426.773.37。789.410.66。531。868。27。891。58。56.637.562.57。993.26.86。743。55
7、6.58.894.75.36。849。650.48。195。84。26.955。444。68。297.03.07。061.138.98.498。02.0(三)0.15Mol/L PB液附表2 0.15Mol/LPB液配制法pH0.15Mol/L Na2HPO4(ml)0.15Mol/L NaH2PO4(ml)6.426.573。56。637。562.56。849。051。07。061。039.07.272。028.07。481。019。07.687.013。0Na2HPO42H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.7g/L。Na2HPO412H2O分子量=358。22 0。1
8、5Mol/L溶液含53。7g/L。NaH2PO4H2O分子量=138.00 0.15Mol/L溶液含20。7g/L.NaH2PO42H2O分子量=156.03 0.15Mol/L溶液含23。4g/L。(四)0.2Mol/L PB缓冲液附表3 0。2mol/L PB缓冲液配制法pH0.2 Mol/L Na2HPO4(ml)0。2Mol/L NaH2PO4(ml)5.88.092.06。012.387.76.218.581.56.426.573。56.637。562.56.849.051。07。061。039。07。272。028.07.481。019.07。687。013。07.891。58.5
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