催乳素(PRL )作业指导书.doc
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1、1. 分析原理采用双抗夹心法原理,整个过程18分钟完成。第1步:10l标本和一份生物素抗泌乳素特异性单克隆抗体一起孵育,反应形成复合体。第2步:添加钌复合体a标记泌乳素特异单克隆抗体和链酶亲和素包被的微粒后,反应生成一“三明治”样抗原抗体复合体,并在生物素和链酶亲和素的相互作用下形成固相。第3步:将反应液吸入检测池中,检测池中的微粒通过电磁作用吸附在电极表面。未结合的物质通过ProCell除去。在电极上加以一定的电压,使复合体化学发光,用光电倍增器检测发光的强度。通过检测仪的定标曲线得到最后的检测结果,定标曲线是通过2点定标点和试剂条形码上获得的主曲线生成的。2. 标本要求只有按如下方法收集的
2、标本才适合用本试剂盒检测。血清必须用标准试管或内有分离胶的试管收集。肝素锂和K3-EDTA血浆。 (原则:回收率90110;斜率0.91.1;相关系数0.95;0.95). 稳定性: 28C可保存14小时;在-20C可保存6月,只可冻溶一次14。内有分离胶的试管收集的血清标本稳定性:2-8C 24小时(注意此数据由试管厂商提供)。 选择检测时市场上能获得的标本收集试管收集标本和检测,不是所有能获得的厂商的试管均可用于检测。不同厂商标本收集系统可能含有不同材料,某些情况下会影响检测结果。 在使用原始试管处理标本时,应遵循试管生产商所提供的指导。 如标本中有沉淀出现,必须先作离心处理再进行分析。已
3、经加热失活的标本无法分析。使用叠氮化物作为稳定剂的标本或质控液无法分析。 检测前,请确保患者标本、定标液及质控液放置在2025C的环境中。 由于蒸发因素的影响,标本、定标液及质控液在放入分析仪后请在2小时内完成测定。3. 试剂、校准品、质控品和其他所需材料采用罗氏原装配套试剂。试剂:M 链酶亲和素包被的微粒(透明瓶盖)每瓶6.5ml 。链酶亲和素包被的微粒,0.72mg/ml;结合力:470ng 生物素/mg 微粒;微粒经过防腐处理。R1 生物素化泌乳素特异性抗体(灰色瓶盖)每瓶10ml。生物素化单克隆抗泌乳素抗体(鼠):0.7mg/L;磷酸盐缓冲液:50mmol/L,PH 值7.0;经过防腐
4、处理。R2 钌复合物标记的泌乳素特异性抗体(黑色瓶盖)每瓶10ml。钌复合物标记抗泌乳素单克隆抗体(鼠):0.35mg/L;磷酸盐缓冲液:50 mmol/L,PH 值7.0;经过防腐处理。其他所需材料:常规实验设备Elecsys E 170/E 411Elecsys 系统清洗液(SysClean),货号Elecsys E 170分析仪所需材料:Elecsys系统缓冲液 (ProCell M),货号Elecsys检测池洗液(CleanCell M),货号ElecsysPC/CC杯,货号Elecsys清洗液(ProbeWash M),货号03005712Elecsys反应杯/加针头/废物袋(CUP
5、/TIP),货号Elecsys系统清洗适配器(SysCleanAdapterM),货号Elecsys E 411分析仪所需材料:Elecsys 系统缓冲液(ProCell),货号Elecsys测量池清洗液(CleanCell),货号Elecsys 系统清洗液(SysWash),货号Elecsys适配器 (Adapter for SysClean),货号11933159,Elecsys反应杯(CUP),货号Elecsys加样头(TIP),货号4. 仪器和校准使用仪器:瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys 2010/E 170/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪仪器校准:每批Elecsys P
6、rolactin试剂盒上都有条形码记录各批号试剂特定的定标信息。预先确定的主曲线适用于用Elecsys Prolactin CalSet试剂盒进行测定的分析仪。定标频率:每批试剂必须用新鲜试剂(试剂经仪器注册24小时以内)标定一次,如再次标定即根据下列要求:一个月(同一批号试剂) 7天(放置仪器上的同一试剂盒)根据要求进行标定:如质控结果超出范围时。5. 操作步骤(以E 170为例)5.1 校准操作步骤:在编缉各项目的参数时,已经在ApplicationCalib菜单中定义好了定标类型和几点定标。因此在对各项目进行定标时,只需在定标菜单Calibration中进行即可。进入Calibratio
7、nStatus菜单,用鼠标选择需定标的项目,再根据需要点单点定标(BLANK键)或两点定标(TWO POINT键)、跨距定标(SPAN键)、多点定标(FULL键),再选择其它项目进行相应选择,最后点SAVE,将定标物放入在CalibrationCalibrator中定义好的位置,点Start,再点Start,仪器开始定标。 在CalibrationStatus菜单中看定标结果,点Calibration Result键看定标结果,点Reaction Monitor键看每个定标物的反应曲线。5.2 样本检测程序: 单个样本输入,在主菜单下选择Workplace- Testslection,在Seq
8、uence No栏输入标本号,然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目,点SAVE键,样本号自动累加。批量常规标本的输入,在主菜单下选择Workplace- Testslection,在Sequence No栏输入起始标本号,然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目,点REPEAT,输入该批标本的最后一个标本号,点OK即可。进样分析,将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好,放入进样盘内,按START键,输入该批上机标本的起始标本号,再点START键,仪器自动开始推架检测标本。6. 质量控制Elecsys通用质控品(PreciControl )1和2或其它合适的质控品。
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