临床微生物标本采集规范PPT课件.ppt
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1、关于临床微生物标本采集规范PPT现在学习的是第1页,共92页世界人口死因世界人口死因 感染性疾病:感染性疾病:2525 抗生素时代,感染仍是人类抗生素时代,感染仍是人类健康的主要健康的主要“杀手杀手”现在学习的是第2页,共92页高死亡率原因高死亡率原因v新现传染病:新现传染病:近近3030年,已有近年,已有近3030种新的病原种新的病原生物,其中包括生物,其中包括HIVHIV、 SARSSARS、禽流感和各种、禽流感和各种新型肝炎病毒等引起的各种疾病。新型肝炎病毒等引起的各种疾病。v再现传染病:再现传染病:以往已被认为得到很好控制的以往已被认为得到很好控制的传染病,如结核、登革热等的流行和传播
2、又传染病,如结核、登革热等的流行和传播又重新抬头。重新抬头。现在学习的是第3页,共92页v低免疫人群急剧上升:低免疫人群急剧上升:艾滋病、移植医学国际间交通的艾滋病、移植医学国际间交通的快速便捷使得当今疾病传播无国界的概念。快速便捷使得当今疾病传播无国界的概念。v气候变暖,人口快速增长,都市化进程加快,伴随人口气候变暖,人口快速增长,都市化进程加快,伴随人口密度和人口流动增加,清洁水源不足和卫生设施的不完密度和人口流动增加,清洁水源不足和卫生设施的不完善,以及生态破坏造成人与媒介生物接触机会增多(善,以及生态破坏造成人与媒介生物接触机会增多(动动物微生物向人类的袭击物微生物向人类的袭击)等。)
3、等。v人类还没有足够的能力战胜病原体人类还没有足够的能力战胜病原体。v病原生物的抗药性产生的速度已超过新型抗生素发明的病原生物的抗药性产生的速度已超过新型抗生素发明的速度(速度(细菌耐药性的快速发展细菌耐药性的快速发展) )。现在学习的是第4页,共92页 提高感染样本送检率提高感染样本送检率 加强细菌耐药监测加强细菌耐药监测 关注细菌性疾病的病原学诊断,已成为关注细菌性疾病的病原学诊断,已成为临床工作者、临床微生物与微生态工作者、临床工作者、临床微生物与微生态工作者、药学家和从事感染控制的工作者共同关注的药学家和从事感染控制的工作者共同关注的热门焦点。热门焦点。现在学习的是第5页,共92页成功
4、治疗感染症的因素成功治疗感染症的因素 成功分离病原菌成功分离病原菌 标本收集、运送、保存标本收集、运送、保存 标本处理方法标本处理方法 检验医师专业知识检验医师专业知识 医师判读病原菌培养结果医师判读病原菌培养结果 选择适当治疗方法选择适当治疗方法现在学习的是第6页,共92页临床医生要合理用好两种数据临床医生要合理用好两种数据v1. 1. 本地区、本单位病原流行病学资料,指导本地区、本单位病原流行病学资料,指导经验用药。经验用药。(微生物室、院感科、临床科室)(微生物室、院感科、临床科室)v2.2.药敏试验报告,纠正经验用药。药敏试验报告,纠正经验用药。 重视病原学检查重视病原学检查, ,尽可
5、能在应用抗菌药物之尽可能在应用抗菌药物之前留取标本送检。以提高病原学诊断率前留取标本送检。以提高病原学诊断率, ,为选为选药和调整药物提供依据。药和调整药物提供依据。现在学习的是第7页,共92页 “正确的微生物学检验始自正确的标本采取。临床医师、护师及检验技师都必须通晓其要领。” 著名的临床微生物检验专著Manual of Clinical Microbiology 的主编Patrick Murray现在学习的是第8页,共92页 标本采集和运送是细菌培养成功的最最重要的关键 但由于标本的采集和运送常由护士或医生或病人自己完成,所以也是最不容易做好的事情,而且不知道问题所在之处,造成的后果是:临
6、床医生最不能接受的问题:阳性率低现在学习的是第9页,共92页国内微生物标本的采集目前存在的问题国内微生物标本的采集目前存在的问题 : 标本送检率低标本送检率低 从全国来看,抗感染治疗从全国来看,抗感染治疗前,送检相关标本可能只占应送标本的一半前,送检相关标本可能只占应送标本的一半左右,与抗菌药物应用率之高形成鲜明的反左右,与抗菌药物应用率之高形成鲜明的反差。一些医师在经验性治疗受挫后方送标本,差。一些医师在经验性治疗受挫后方送标本,此时已失去阳性培养的机会。此时已失去阳性培养的机会。 标本有缺陷标本有缺陷 正确收集各种临床标本,正确收集各种临床标本,关注特检标本采样与送检的方法和条件,是关注特
7、检标本采样与送检的方法和条件,是完成病原学诊断的先决条件。完成病原学诊断的先决条件。现在学习的是第10页,共92页微生物让人类步步为营,微生物让人类步步为营,我们应该追求:我们应该追求:“准确的病原学诊断准确的病原学诊断”“针对性病原学治疗针对性病原学治疗”正确的微生物标本采集和运送,正确的微生物标本采集和运送,是准确的病原学诊断的前提!是准确的病原学诊断的前提!现在学习的是第11页,共92页标本规范化采集的重要性标本规范化采集的重要性v正确采集、处理与运送细菌培养的标本直接关系到致病正确采集、处理与运送细菌培养的标本直接关系到致病菌培养的正确性与阳性率的高低,是临床细菌检验成功菌培养的正确性
8、与阳性率的高低,是临床细菌检验成功的关键。的关键。v标本质量的好坏直接影响诊断结果的正误,标本质量的好坏直接影响诊断结果的正误,不当的标不当的标本可导致假阴性、假阳性结果的出现,因此标本采集本可导致假阴性、假阳性结果的出现,因此标本采集与处理的规范化是准确、及时地向临床提供重要的临与处理的规范化是准确、及时地向临床提供重要的临床感染信息的基础。床感染信息的基础。v好的微生物检验标本可提升实验室工作效率及病患照顾好的微生物检验标本可提升实验室工作效率及病患照顾质量,降低医疗成本。质量,降低医疗成本。现在学习的是第12页,共92页如何提高细菌阳性检出率如何提高细菌阳性检出率标本采集时机标本采集时机
9、标本采集方法标本采集方法标本的质与量标本的质与量标本的运送与保存标本的运送与保存镜检筛选合格标本镜检筛选合格标本高质量、多种分离培养基高质量、多种分离培养基培养环境培养环境合理的收费制度合理的收费制度现在学习的是第13页,共92页微生物样本采样基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检甚至床旁接种尤其是厌氧培养5.棉拭子标本宜用运送培养基6.混有正常菌群污染标本,不可置肉汤培养7.标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂8.送检标本应注明来源和检验目的现在学习的是第14页,共92页标本收集部位 非无菌部位 无菌部位 眼 血液
10、耳 脊髓液 呼吸道 胸膜液 肠胃道 腹膜液 泌尿道 关节液 皮肤 毛发现在学习的是第15页,共92页一、血培养标本采集规范一、血培养标本采集规范现在学习的是第16页,共92页相似规模医院的血培养数相似规模医院的血培养数 国内多数三甲综合医院国内多数三甲综合医院2 210 10 瓶瓶/ /天天 复旦大学中山医院复旦大学中山医院20205050瓶瓶/ /天天 香港玛丽医院香港玛丽医院200200瓶瓶/ /天天 台湾大学医院台湾大学医院300300瓶瓶/ /天天 我院约我院约10102020瓶瓶/ /天天现在学习的是第17页,共92页(一)血培养检测采血指征(一)血培养检测采血指征 临床上疑为败血症
11、、脓毒血症或其他血液感染的患者临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者 1. 1. 发热(发热(3838)或低温()或低温(3636)2. 2. 寒战寒战3. 3. 白细胞增多(白细胞增多(101010109 9/L/L,特别有,特别有“核左移核左移”未成熟的未成熟的或杆状核白细胞增多)或杆状核白细胞增多) 4. 4. 粒细胞减少(成熟的多核白细胞粒细胞减少(成熟的多核白细胞110105 5CFU/ml CFU/ml 或革兰阳性球菌数或革兰阳性球菌数10104 4CFU/mlCFU/ml时有临床诊断意时有临床诊断意义。义。 (不是绝对的,受多因素影响,综合判断)(不是绝对的,受多因素影响
12、,综合判断)v2. 2. 尿液标本的采集和培养中的问题是污染杂菌,故应严格进行尿液标本的采集和培养中的问题是污染杂菌,故应严格进行无菌操作无菌操作。v3. 3. 尿标本采集后应立即送检,以免污染,尿液中尿标本采集后应立即送检,以免污染,尿液中不得加不得加防腐剂和消毒剂防腐剂和消毒剂。现在学习的是第52页,共92页v4.4.除非是流行病学调查,除非是流行病学调查,长期留置导尿管患者常规尿培养没长期留置导尿管患者常规尿培养没有临床意义有临床意义,大量病原菌常可在这类患者中检出,导,大量病原菌常可在这类患者中检出,导尿管留置时间延长易导致与引起患者尿道感染不一致尿管留置时间延长易导致与引起患者尿道感
13、染不一致的微生物定植生长;的微生物定植生长;v5.5.不可从集尿袋的下端管口留取标本,集尿袋内的尿不可从集尿袋的下端管口留取标本,集尿袋内的尿液也不能用于培养,可能会引起污染;液也不能用于培养,可能会引起污染;v6.6.临床常让患者留取清洁中段尿,临床常让患者留取清洁中段尿,应该在医护人员监督应该在医护人员监督指导下让患者正确的留取清洁中段尿指导下让患者正确的留取清洁中段尿;v7.7.由于种种原因,患者常常不能正确地留取清洁中段尿,由于种种原因,患者常常不能正确地留取清洁中段尿,实验室只是针对尿液标本培养的结果进行评估,或常常由实验室只是针对尿液标本培养的结果进行评估,或常常由于分析前尿液标本
14、污染了多种细菌无法正确解释的结果,于分析前尿液标本污染了多种细菌无法正确解释的结果,可能延误了临床的正确诊断和治疗。可能延误了临床的正确诊断和治疗。现在学习的是第53页,共92页下列因素可使尿液中细菌数量减少,判断结果时下列因素可使尿液中细菌数量减少,判断结果时应注意应注意使用抗生素治疗,细菌生长受到抑制;使用抗生素治疗,细菌生长受到抑制;尿液稀释,尿比重尿液稀释,尿比重1.0031.003,营养成分减少,细菌生长迟缓;,营养成分减少,细菌生长迟缓;尿尿PHPH5.05.0或或8.58.5,细菌生长受阻;,细菌生长受阻;尿频时,膀胱内细菌停留时间短,菌落数减少;尿频时,膀胱内细菌停留时间短,菌
15、落数减少;尿道口消毒液混入标本中,影响细菌繁殖,菌落数减少;尿道口消毒液混入标本中,影响细菌繁殖,菌落数减少;不同种类的细菌生长速度不同、营养要求不同,菌落计数有所不同种类的细菌生长速度不同、营养要求不同,菌落计数有所不同。不同。现在学习的是第54页,共92页四、四、 大便培养标本采集规范大便培养标本采集规范 现在学习的是第55页,共92页(一)采集时间(一)采集时间v腹泻患者应在急性期,并尽可能在使用抗生素之前采集新鲜粪便;腹泻患者应在急性期,并尽可能在使用抗生素之前采集新鲜粪便;伤寒患者在发病伤寒患者在发病2 2周以后。周以后。(二)采集方法(二)采集方法v1 1自然排便采集法自然排便采集
16、法 自然排便后,挑取有自然排便后,挑取有脓血或黏液脓血或黏液部位的粪部位的粪便便2-3g 2-3g ,液状粪便取絮状物盛于无菌的容器内或置于保存液或,液状粪便取絮状物盛于无菌的容器内或置于保存液或增菌液中送检。增菌液中送检。v2 2直肠拭子采集法直肠拭子采集法 对不易获得粪便或排便困难的患者及婴对不易获得粪便或排便困难的患者及婴幼儿,可采用直肠拭子法采集标本,其方法是将拭子前端用幼儿,可采用直肠拭子法采集标本,其方法是将拭子前端用甘油湿润。然后插入肛门约甘油湿润。然后插入肛门约4 45cm5cm(幼儿约(幼儿约2 23cm3cm)处,轻轻)处,轻轻在直肠内旋转,擦取直肠表面粘液后取出,盛入无菌
17、试管或保存在直肠内旋转,擦取直肠表面粘液后取出,盛入无菌试管或保存液中送检。液中送检。现在学习的是第56页,共92页(三)实验室检查(三)实验室检查 v肠道细菌大多为革兰阴性杆菌,且因粪便标本中有各种正肠道细菌大多为革兰阴性杆菌,且因粪便标本中有各种正常菌群,形态上区分困难,因此常菌群,形态上区分困难,因此一般不做直接涂片检查一般不做直接涂片检查。v只有当临床怀疑肠道菌群失调或检查霍乱弧菌、结核分枝只有当临床怀疑肠道菌群失调或检查霍乱弧菌、结核分枝杆菌、疑似葡萄球菌或难辩梭菌引起的伪膜性肠炎以及真杆菌、疑似葡萄球菌或难辩梭菌引起的伪膜性肠炎以及真菌性腹泻时,才做直接涂片检查。菌性腹泻时,才做直
18、接涂片检查。v疑似葡萄球菌引起的抗菌素相关性肠炎,可取水样便或肠疑似葡萄球菌引起的抗菌素相关性肠炎,可取水样便或肠黏膜样物涂片,革兰染色后镜检,见革兰阴性杆菌明显减黏膜样物涂片,革兰染色后镜检,见革兰阴性杆菌明显减少,革兰阳性球菌大量散在或成堆(葡萄状)排列,可提少,革兰阳性球菌大量散在或成堆(葡萄状)排列,可提示示肠道菌群失调肠道菌群失调。现在学习的是第57页,共92页(四)注意事项(四)注意事项v在腹泻发病的正确时间收集标本,病人应尽量在急性在腹泻发病的正确时间收集标本,病人应尽量在急性期(期(3d3d)内和用药前采集标本,以提高检出率。)内和用药前采集标本,以提高检出率。v大便标本中含有
19、很多杂菌,粪便标本的采集须注意防止大便标本中含有很多杂菌,粪便标本的采集须注意防止外界脏物污染,外界脏物污染,尽量采用无菌容器。尽量采用无菌容器。v为提高阳性检出率,要采集新鲜标本,立即送检。为提高阳性检出率,要采集新鲜标本,立即送检。现在学习的是第58页,共92页五、五、 生殖道标本采集规范生殖道标本采集规范 现在学习的是第59页,共92页(一)送检指征(一)送检指征1. 1. 男性泌尿系统表现男性泌尿系统表现尿急、尿频、尿痛尿急、尿频、尿痛尿道分泌物增多尿道分泌物增多会阴部疼痛及阴囊疼痛会阴部疼痛及阴囊疼痛性功能障碍性功能障碍泌尿生殖器畸形和缺损泌尿生殖器畸形和缺损现在学习的是第60页,共
20、92页2. 2. 女性泌尿系统表现女性泌尿系统表现分泌物增多及性状异常分泌物增多及性状异常尿道口搔痒及脓性分泌物流畅尿道口搔痒及脓性分泌物流畅下腹疼痛下腹疼痛月经失调月经失调阴道出血阴道出血外阴搔痒外阴搔痒外阴或阴道疼痛外阴或阴道疼痛性功能障碍性功能障碍现在学习的是第61页,共92页(二)标本采集(二)标本采集v 生殖器官标本包括子宫颈、阴道、前列腺;生殖器官标本包括子宫颈、阴道、前列腺;男性及女性外生殖器的分泌物及经血等。应男性及女性外生殖器的分泌物及经血等。应根据感染的部位和可能的病原体决定用于病根据感染的部位和可能的病原体决定用于病原学诊断的标本种类、采集部位和采集方法原学诊断的标本种类
21、、采集部位和采集方法等。阴道、子宫颈及前列腺等分泌物应由医等。阴道、子宫颈及前列腺等分泌物应由医师采集,收集于无菌试管内送检。师采集,收集于无菌试管内送检。现在学习的是第62页,共92页v尿道分泌物1.女性尿道:患者排尿1小时后采集,首先拭去尿道口的渗出物;再用拭子通过阴道,靠着耻骨联合,按摩尿道,采集分泌物;如未获得分泌物,清洗外尿道,用灭菌纱布或棉球擦拭,用泌尿生殖道拭子插入尿道24cm,旋转拭子2秒。2. 男性尿道:用泌尿生殖道拭子插入尿道腔24cm,旋转拭子,至少停留20秒,而使之容易吸收。现在学习的是第63页,共92页v阴道分泌物 擦除过多的分泌物和排出液,用无菌棉拭子采取阴道口内4
22、厘米内侧壁或后穹窿处分泌物,如果需要涂片,需再用一个拭子。v男性前列腺:用前列腺按摩法采集前列腺液。清洗尿道口,冲洗尿道膀胱,从肛门用手指按摩前列腺,使前列腺液溢出,用无菌容器收集。无肉眼可见脓液时,可用灭菌拭子轻轻伸入前尿道内,旋转拭子采集标本。现在学习的是第64页,共92页(三)注意事项(三)注意事项 1.1.生殖器是开放性器官,标本采集过程中应严格遵生殖器是开放性器官,标本采集过程中应严格遵循无菌操作规程以减少杂菌污染。循无菌操作规程以减少杂菌污染。 2.2.由于阴道正常菌群的存在而使细菌的分离鉴定由于阴道正常菌群的存在而使细菌的分离鉴定受到干扰,所以在采集女性生殖道标本时应注意尽受到干
23、扰,所以在采集女性生殖道标本时应注意尽量量减少或避免正常菌群的污染减少或避免正常菌群的污染。 3.3.疑有宫腔感染,如遇产妇需行剖宫产,待胎儿疑有宫腔感染,如遇产妇需行剖宫产,待胎儿娩出后取宫腔分泌物,并同时取婴儿耳拭子一同送娩出后取宫腔分泌物,并同时取婴儿耳拭子一同送检。检。 4.4.沙眼衣原体和病毒沙眼衣原体和病毒均在宿主细胞内繁殖,取材均在宿主细胞内繁殖,取材时拭子应在病变部位(移行上皮处稍内)停留十几时拭子应在病变部位(移行上皮处稍内)停留十几秒钟,并采集尽可能多的上皮细胞。秒钟,并采集尽可能多的上皮细胞。现在学习的是第65页,共92页 5. 5. 生殖道感染生殖道感染厌氧菌厌氧菌也较
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