微生物室细菌菌落总数测定操作规程(3页).doc
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1、-微生物室细菌菌落总数测定操作规程-第 3 页微生物室菌落总数测定操作规程菌落总数:将一定量的待测样在营养琼脂上,有氧条件下37培养48h后,营养琼脂中所含菌落的总数1 材料准备1.1 培养基与试剂1.2 营养琼脂培养基1.2.1.1 成分a蛋白胨 10gb牛肉膏 3gc氯化钠 5gd琼脂 1020ge蒸馏水 1000mlf生理盐水 约1000ml.2 制法将上述成分混合并加热溶解后,加入琼脂加热溶化,然后补足所需要的水分,再7.6,然后放入三角瓶中包扎好后,在121条件下灭菌20min,冷却备用。1.3 仪器a 高压蒸汽灭菌器(锅)b 恒温培养箱(371)c 电炉d 天平e 冰箱f 放大镜g
2、 pH计(或精密pH试纸)h 灭菌试管、平皿(=9cm)、刻度吸管、管塞等i 灭菌移液枪枪头j 玻璃菌落涂布器2 检验步骤2.1 取样并稀释2.1.1 制备无菌生理盐水制取1000ml生理盐水,在121条件下灭菌20min冷却至室温,放置于无菌条件下备用。 取样稀释用灭菌注射器(或灭菌吸管)吸取一定量的待测样品注入已盛有一定量灭菌生理盐水和足够的玻璃珠的灭菌三角瓶中,扎好瓶口,在震荡器中振摇20min,制成10-1的菌悬液,再用无菌吸管(或移液枪)在10-1的菌悬液取1ml,加入另一个已盛有9ml无菌生理盐水的试管中,混匀,制成10-2的菌悬液。按此法依次制成10-3,10-4,10-5,10
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