荧光定量PCR技术用于食品肉类种源掺假鉴定.doc
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1、荧光定量PCR技术用于食品肉类种掺假鉴定在国内及国际贸易中,我国肉制品掺杂、以次充好的欺骗行为屡见不鲜,严重损害了消费者的利益,并且对我国出口肉制品在国际市场上的声誉造成损害。要杜绝这些掺杂使假的现象,关键手段是要建立一种能快速准确鉴别动物种成分的检测方法,为上述产品的质量做本质上的把关,进步执法的科学性和高效性,进一步进步检验检疫通关速度。因此,建立一种快速、灵敏、特异的检测肉类种的检测方法一直是有待解决的难题。目前,动物性成分鉴别的主要方法有物理、化学、免疫学和分子生物学方法。物理学鉴别方法常用镜检法,通过观察来区分禽类、哺乳动物和鱼类,但该方法本身却并不能区分动物的种类。在检测的过程中,
2、需要有经历的检验员进展操作,可以定量检测0.1%以下的骨片段。化学方法进展动物性分析p 主要有色谱法和光谱法两种,但是化学方法的样品制备比拟复杂,检测仪器相对较贵,无法分析p 高度处理过的样品。免疫学方法以检测蛋白质为根底,主要有同工酶检测、酶联免疫吸附分析p ELISA以及电泳方法等,但其由于缺乏较高重现性和灵敏度以及受样品性质影响而受到限制。免疫学鉴别方法主要用于鉴别粗加工肉类的动物种类,只有少数的方法可以用于检测蒸煮肉类的蛋白质,因此很多的免疫学鉴别方法都不能用于热处理肉品。分子生物学方法主要有常规PCR、多重PCR、实时荧光PCR等,同时DNA杂交技术、PCR-电泳、PCR-限制性片段
3、长度多态分析p 技术、随机引物的扩增法、环介导等温扩增技术、DNA基因检测手段式PCR技术等也是目前开展较为领先的几种分子生物学方法。荧光定量PCR通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进展标记跟踪,实时在线监控反响过程,结合相应的软件可以对产物进展分析p ,计算待测样品模板的初始浓度。本方法检测原理主要利用一对动物线粒体基因保守区域特异性引物,配以FQ-Buffer、耐热DNA聚合酶Taq酶、四种核苷酸单体dNTPs等成分,通过聚合酶链反响PCR-荧光法进展体外扩增,从而到达快速检测的目的。基于荧光定量分析p 技术,根据常见动物如猪、驴、牛、羊的DNA序列,设计并最后确定了特异引物
4、,建立了荧光定量PCR检测方法,可以用于猪、驴、牛、羊肉及肉制品的种成分快速鉴定检测分析p ,具有高效、快速、准确的特点,可进展批量样本快速检测。方法主要用于检测动物组织、血液以及食品、肉类制品、饲料中有动物种性特定成份鉴定,是适用于政府检测机构、食品加工企业、进出口贸易企业的优秀的检测分析p 方法。并且检测结果可以到达与国家要求的行业检测标准相一致,与欧盟、美国FDA检测标准相符合。荧光定量PCR技术用于食品肉类种检测方法建立1 检测原理本检测方法用一对线粒体基因保守区域特异性引物,配以FQ-Buffer、耐热DNA聚合酶Taq 酶、四种核苷酸单体dNTPs等成分,通过聚合酶链反响PCR-荧
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- 荧光 定量 PCR 技术 用于 食品 肉类 掺假 鉴定
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