交叉配血知识PPT课件.ppt
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1、关于交叉配血知识第一张,PPT共三十二页,创作于2022年6月22022/10/19nRBC表面有丰富唾液酸,在中性环境中带负电荷,互相分离。可通过缩短细胞间距,以及在致敏细胞上的抗体之间搭桥使RBC凝集。n凝集一般为二个步骤 抗体吸附于RBC抗原上成为致敏状态 致敏RBC凝集形成块状第二张,PPT共三十二页,创作于2022年6月32022/10/19标本的采集及要求标本的采集及要求一一血型血型二二不规则抗体的筛选不规则抗体的筛选 三三交叉配血交叉配血四四一一二三四第三张,PPT共三十二页,创作于2022年6月42022/10/19标本的采集与要求标本的采集与要求第四张,PPT共三十二页,创作
2、于2022年6月52022/10/191.1.标本要新鲜标本要新鲜:n 前三个月内输血或妊娠:配血试验标本抽取48h,避免因回忆反应产生的抗体漏检。n 新近的输血或妊娠:可引起意外抗体迅速出现,如果对病人的输血史或人身史不明,使用的标本必须是输血前48h内抽取的。n 血量约为5ml。2.2.使用右旋糖酐、使用右旋糖酐、pvppvp等:等:n 治疗前抽取标本备用,防止RBC缗钱状凝集的干扰标本要具有代表性,能代表标本要具有代表性,能代表患者目前状况患者目前状况第五张,PPT共三十二页,创作于2022年6月62022/10/193.243.24小时内输了小时内输了12u12u血血后:n 可输注未经
3、交叉配血的ABO、RH同型的血液,因为原始交叉配血用的血清已不能代表患者血清的情况。4.4.防止血样的稀释和溶血的产生防止血样的稀释和溶血的产生:n 溶血标本一般不使用,因为血清中游离血红蛋白可掩盖在输血前实验中抗体反映引起的溶血5 5.标本标识标本标识:唯一性标识无误、与输血申请单一致6.6.使用血浆标本:使用血浆标本:应排除纤维蛋白原的干扰7.7.输血后标本保存:输血后标本保存:2-8,至少一周。第六张,PPT共三十二页,创作于2022年6月72022/10/19血血 型型1.1.红细胞悬液的配制红细胞悬液的配制2.2.离心力的标准离心力的标准3.3.离心后结果观察离心后结果观察4.4.盐
4、水试验盐水试验5.5.正反定型结果不一致原因及处理正反定型结果不一致原因及处理第七张,PPT共三十二页,创作于2022年6月82022/10/191.1.红细胞悬液的配制红细胞悬液的配制n 洗涤洗涤 洗涤目的:去除RBC表面物质少量的血浆蛋白已溶解红细胞的基质(有竞争抗体的作用)抗凝剂(有抗补体的作用)至少要用大量生理盐水洗一次n 浓度浓度n2%:一般用于抗体效价的测定n5%:一般用于血型鉴定、配血试验、抗球蛋白试验等大多数血型血清学试验n10%:一般用于测定抗体的亲和力试验第八张,PPT共三十二页,创作于2022年6月92022/10/192.2.离心力的标准离心力的标准 n 不同规格离心机
5、,力矩不同,统一离心转速,但没有统一离心力。离心转速换算公式:RCF=1.118 10-5 (rpm)2 R(cm)3.3.离心后结果观察注意事项离心后结果观察注意事项n 将试管成30-45角拿在手上,细胞扣朝上,手腕轻轻用力,用液体去冲细胞扣。n 切不可用力使劲摇试管,那样凝集颗粒会被摇散,弱凝集则会误判为阴性。-细胞成细沙状沿试管壁流下+细胞成块状或成齿状沿试管壁流下第九张,PPT共三十二页,创作于2022年6月102022/10/19常用的记录符号及所示的凝集强度4+一个大的凝集块,背景透明,无游离细胞3+数个大凝集块,背景透明,无游离细胞2+许多小凝集块,肉眼可见,大小均匀,背景基本透
6、明,有游离细胞1+很小的凝集块,肉眼可见,背景不透明,游离细胞较多,需要用显微镜观察W+微小凝集块,肉眼很难看清,背景混浊,要用显微镜观察O无凝集,无溶血,全部是游离细胞,要用显微镜观察PH 部分溶血H完全溶血WF 混合外观第十张,PPT共三十二页,创作于2022年6月112022/10/19 4.4.盐水试验盐水试验F 多采用立即离心法 正确的操作是:RBC悬液加到血清后立即离心并观察结果反应时间过长而延误离心对ABO血型系统的抗体检出影响室温2分钟后离心可能使3+4+的凝集减弱凝集减弱为0+1+,并有溶血室温5分钟后离心原有凝集可能消失凝集可能消失,并有溶血并有溶血有的标本延迟离心原有凝集
7、会变为既不凝也不溶血既不凝也不溶血,难以发现ABO血型的不配合。(多发生在O型人的血清抗体与A型、B型或AB型红细胞反应的试验中,发生率为2%-3%.发生机制是反应强的抗A、抗B和抗原强度强的A、B抗原作用,补体C1在有Ca2+存在的条件下,固定到红细胞膜上,妨碍了红细胞的凝集,进一步可能引起溶血)解决的方法:A:血清与红细胞混合后立即离心。B:用血浆或灭活的血清做试验 C:用EDTA盐水配制红细胞悬液,D:稀释血清第十一张,PPT共三十二页,创作于2022年6月122022/10/19F加样时先加血清再加红细胞,以避免漏加;F抗体和抗原的比例一般为2:1。F必须要做正反定型实验才能确定血型。
8、F正定型试验有条件可加做抗AB(检测弱A、弱B)F反定型一定要加做O细胞,(发现不规则抗体)第十二张,PPT共三十二页,创作于2022年6月132022/10/195.5.正反定型结果不一致正反定型结果不一致F原因:技术、受检红细胞或血清本身(1 1)技术和管理错误)技术和管理错误L器材不洁 假阳L试剂污染或不足 假阳L标本和试剂搞错 假阳 、假阴L离心过度或不足 假阳 、假阴L结果记录或判断错误 假阳 、假阴L漏加试剂 假阴L阳性反应产生溶血现象未能识别假阴第十三张,PPT共三十二页,创作于2022年6月142022/10/19(2 2)标准血清效价太低、亲和力不强)标准血清效价太低、亲和力
9、不强。如抗A血清效价不高,可将A亚型误定为O型,AB型误定为B型。(3 3)红细胞悬液过浓或过淡,抗原抗体比例不适当)红细胞悬液过浓或过淡,抗原抗体比例不适当,使反应不明显,误判为阴性反应。(4 4)血清异常)血清异常 华通胶或血清蛋白异常引起串钱状形成,影响反定性结果(5 5)红细胞致敏)红细胞致敏 在含高蛋白介质试剂中可发生凝集,产生假阳性(6 6)近期曾异型输血)近期曾异型输血,病人血液标本成为不同型别的红细胞混合物,定型时显示“混合外观凝集”现象。(7 7)疾病因素导致抗原减弱)疾病因素导致抗原减弱 某些白血病病人ABO血型抗原可受到抑制,检出困难。(8 8)红细胞多凝集现象)红细胞多
10、凝集现象 RBC因遗传或获得性的表面异常,发生多凝集现象。第十四张,PPT共三十二页,创作于2022年6月152022/10/19(9 9)获得性类获得性类B B 由于G-杆菌作用,RBC可获得“类B”活性(1010)异常血浆蛋白)异常血浆蛋白 病人血浆中异常的白蛋白、球蛋白比例异常和高浓度的FIB等能导致缗钱状形成,造成假凝集现象(1111)近期内进行大量的血浆置换血浆置换治疗,影响抗体效价,造成反定型困难。(1212)不规则抗体的产生)不规则抗体的产生 受检者血浆中,含有ABO血型抗体以外的不规则抗体,如自身抗I,与试剂A、B细胞上的相应抗原起反应。(1313)低丙种球蛋白血症)低丙种球蛋
11、白血症 可能会因免疫球蛋白水平全面下降使血清定型时不见凝集或仅见弱凝集反应。(1414)药物等因素)药物等因素 药物、右旋糖酐等静脉注射某些造影剂可引起红细胞聚集而类似凝集。(1515)年龄因素)年龄因素 如新生儿、老年人等。第十五张,PPT共三十二页,创作于2022年6月162022/10/19n 正反定型不一致的处理方法正反定型不一致的处理方法n 首先要重做试验一次。严格执行操作规程,使用质量合格的试剂以及细心观察结果,可解决明显的问题.n 对一些疑难问题需进一步检查。可初步采取以下措施:1)重新抽样,纠正因污染或搞错标本造成的不符。2)将红细胞洗涤数次,配成5%盐水细胞悬液,用抗A、抗B
12、、抗A+B做实验,可得到其他有用信息。有条件加做抗H试验 3)对受检者作直接抗人球蛋白试验,看RBC有没有被致敏4)如疑为A抗原或B抗原减弱,可将受检红细胞与抗A或抗B血清作吸收放散试验。5)如试验结果红细胞成缗钱状排列,加等渗盐水1滴混匀,往往可使缗钱现象消失。6)做反定型试验时需要加做O细胞。第十六张,PPT共三十二页,创作于2022年6月172022/10/19F 疑难血型病例疑难血型病例1.白血病血型变异2.血浆蛋白紊乱3.类B4.多/全凝集5.冷凝集6.ABO亚型第十七张,PPT共三十二页,创作于2022年6月182022/10/19三、不规则抗体的筛选三、不规则抗体的筛选1.筛选目
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