食品微生物学检验 菌落总数测定.作业指导书.pdf
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1、食品微生物学检验 菌落总数测定1、范围:本方法适用于食品中菌落总数的测定。2、定义:食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每 g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。3、主要设备与材料:3.1 恒温培养箱:36 1,30 1。3.2 冰箱:2 5。3.3 恒温水浴箱:46 1。3.4 天平:感量为 0.1 g。3.5 均质器。3.6 振荡器。3.7 无菌吸管:1 mL、10 mL 或微量移液器及吸头。3.8 无菌锥形瓶:容量 250 mL、500 mL。3.9 无菌培养皿:直径 90 mm。3.10 pH 计或 pH 比色管或精密 pH 试纸。3.11 放大
2、镜或/和菌落计数器。3.12 培养基和试剂4、培养基与试剂:4.1 平板计数琼脂培养基4.2 磷酸盐缓冲液4.3 无菌生理盐水5、操作步骤5.1 样品的稀释固体和半固体样品:称取 25 g 样品置盛有 225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000 r/min10000 r/min 均质 12 min,制成 1:10 的样品匀液。液体样品:以无菌吸管吸取 25 mL 样品置盛有 225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成 1:10 的样品匀液。用 1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取 1:10 样品匀液 1 mL,沿管壁缓慢注
3、于盛有 9 mL 稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用 1 支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成 1:100 的样品匀液。按上述操作,制备 10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用 1 次 1 mL 无菌吸管或吸头。根据对样品污染状况的估计,选择 23 个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行 10 倍递增稀释时,吸取 1 mL 样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。同时,分别吸取 1 mL 空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。及时将 1520 mL 冷却至 46 的平板计数琼脂培养基(可放置于 46 1恒温水浴箱中保温)倾注平皿
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