《医学细胞生物学》PPT课件.ppt
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1、第一篇第一篇细胞生物学细胞生物学 细胞生物学概论细胞生物学概论 生命的基本单位细胞生命的基本单位细胞 细胞膜细胞膜 细胞质细胞质 细胞核细胞核第一章第一章医学细胞生物学概论医学细胞生物学概论研研究究内内容容研研究究方方法法第一节第一节医学细胞生物学研究内容医学细胞生物学研究内容细细胞胞生生物物学学是是从从细细胞胞、亚亚细细胞胞和和分分子子三三个个水水平平研研究究生生命命现现象象和和本本质质的的科科学学医医学学细细胞胞生生物物学学是是一一门门专专门门研研究究与与人人体体医医学学有有关关的的细细胞胞生生物物学学形态:形态:观察和分析细观察和分析细胞内各部分的超微结胞内各部分的超微结构和分子结构构和
2、分子结构功能:功能:探索和揭示生探索和揭示生命活动的具体反应过命活动的具体反应过程,真正了解人体的程,真正了解人体的生、老、病、死等各生、老、病、死等各种生命现象。种生命现象。第二节第二节医学细胞生物学的研究方法医学细胞生物学的研究方法u显微技术显微技术u生物化学与分子生物学技术生物化学与分子生物学技术u细胞分离技术细胞分离技术u细胞培养与细胞杂交细胞培养与细胞杂交一、显微技术一、显微技术显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜和电子显微镜不同,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。两大类。普普通通光光学学显显微微镜镜荧光显微镜荧光显微镜细胞
3、中有些物质,如叶绿细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可色后,经紫外线照射亦可发荧光发荧光荧光显微镜照片荧光显微镜照片(微管呈绿色、微丝红色、核蓝色)(微管呈绿色、微丝红色、核蓝色)激光共聚焦扫描显微镜激光共聚焦扫描显微镜蓝蓝色色为为细细胞胞核核绿绿色色为为微微管管激光共聚焦扫描显微镜用激光作扫描光源,由于激光束的波长较短,激光共聚焦扫描显微镜用激光作扫描光源,由于激光束的波长较短,光束很细,所以共焦激光扫描显微镜
4、有较高的分辨力,大约是普通光学光束很细,所以共焦激光扫描显微镜有较高的分辨力,大约是普通光学显微镜的显微镜的3倍。倍。调焦深度不一样时,就可以获得样品不同深度层次的图像,这些调焦深度不一样时,就可以获得样品不同深度层次的图像,这些图像信息都储于计算机内,通过计算机分析和模拟,就能显示细胞样品图像信息都储于计算机内,通过计算机分析和模拟,就能显示细胞样品的立体结构。的立体结构。暗视野显微镜暗视野显微镜照明光线不直接进人物镜,只允许被标本照明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野反射和衍射的光线进入物镜,因而视野的背景是黑的,物体的边缘是亮的。的背景是黑的,物体的边缘是
5、亮的。利用这种显微镜能见到小至利用这种显微镜能见到小至4200nm的微的微粒子,分辨率可比普通显微镜高粒子,分辨率可比普通显微镜高50倍。倍。相差显微镜相差显微镜把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,使各从而提高了各种结构间的对比度,使各种结构变得清晰可见。种结构变得清晰可见。这种显微镜最大的特点是可以观察未经染这种显微镜最大的特点是可以观察未经染色的标本和活细胞。色的标本和活细胞。一种介壳虫的染一种介壳虫的染色体色体微分干涉差显微镜微分干涉差显微镜优点是能显示结构的三维立优点是能显示结构的三维立体投影影像,使细胞的结构,体投
6、影影像,使细胞的结构,特别是一些较大的细胞器,特别是一些较大的细胞器,如核、线粒体等,立体感特如核、线粒体等,立体感特别强,适合于显微操作。别强,适合于显微操作。目前像基因注入、核移植、目前像基因注入、核移植、转基因等的显微操作常在这转基因等的显微操作常在这种显微镜下进行。种显微镜下进行。倒置显微镜倒置显微镜用于观察培养的用于观察培养的活细胞活细胞透射电子显微镜透射电子显微镜1932年年Ruska发明了以发明了以电子束为光源,电子束为光源,用电磁用电磁场作透镜场作透镜的电子显微镜的电子显微镜。电子显微镜的放大倍数电子显微镜的放大倍数最高可达近百万倍最高可达近百万倍p透射电子显微镜透射电子显微镜
7、p扫描电子显微镜扫描电子显微镜RER的形态的形态显显微微操操作作/注注射射仪仪二、生物化学与分子生物学技术二、生物化学与分子生物学技术u细胞化学技术细胞化学技术组织化学或细胞化学染色:是利用染色剂组织化学或细胞化学染色:是利用染色剂可同细胞的某种成分发生反应而着色的可同细胞的某种成分发生反应而着色的原理,对某种成分进行定性或定位研究原理,对某种成分进行定性或定位研究的技术。的技术。利用这种方法对细胞的各种成分几乎都能利用这种方法对细胞的各种成分几乎都能显示,包括有无机物、醛、蛋白质、糖显示,包括有无机物、醛、蛋白质、糖类、脂类、核酸、酶等。类、脂类、核酸、酶等。u免疫细胞化学免疫细胞化学根据免
8、疫学原理,利用抗体同特定抗原专根据免疫学原理,利用抗体同特定抗原专一结合,对抗原进行定位测定的技术。一结合,对抗原进行定位测定的技术。如果将抗体结合上标记物,再与组织中的如果将抗体结合上标记物,再与组织中的抗原发生反应,即可在光镜或电镜下显示抗原发生反应,即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于组织中的部位。出该抗原存在于组织中的部位。常用的标记物有荧光素和酶。常用的标记物有荧光素和酶。荧光素标记的称为荧光素标记的称为免疫荧光法免疫荧光法酶标记的称为酶标记的称为酶标免疫法酶标免疫法u显微光谱分析技术显微光谱分析技术细胞中有一些成分具有特定的吸收光谱,核细胞中有一些成分具有特定的吸收光谱,核酸、蛋白
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