实验诱导细胞融合聚乙二醇法精.ppt
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1、实验诱导细胞融合聚乙二醇法第1页,本讲稿共10页 一、实验目的一、实验目的 了解细胞融合的原理,初步掌握用了解细胞融合的原理,初步掌握用PEG诱导细胞诱导细胞融合的方法。融合的方法。二、实验原理二、实验原理 聚乙二醇聚乙二醇(PEG)结构为:)结构为:CH2(OH)-(CH20CH2)n-CH2OH;相对分子质量在相对分子质量在2000-6000均可用作细胞融合剂。均可用作细胞融合剂。第2页,本讲稿共10页v普遍认为聚乙二醇分子能改变各类细胞的膜结构,使普遍认为聚乙二醇分子能改变各类细胞的膜结构,使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组,由两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组,由于两
2、细胞接口处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用,从而使细胞发生融合。表面张力作用,从而使细胞发生融合。v细胞融合率细胞融合率是指在显微镜的一个视野内,已发生融合的是指在显微镜的一个视野内,已发生融合的细胞其细胞核总数与该视野内所有细胞细胞其细胞核总数与该视野内所有细胞(包括已融合的细包括已融合的细胞胞)的细胞核总数之比,通常以百分比表示。的细胞核总数之比,通常以百分比表示。第3页,本讲稿共10页三、实验材料与用品三、实验材料与用品v材料:材料:鸡血红细胞鸡血红细胞v试剂:试剂:(1)Alsver液:液:(2)0.85生理盐水:生理盐水:(3
3、)GKN液:液:(4)Ringer溶液:溶液:(5)Hanks液:液:(6)50PEG混合液混合液(7)0.2%次甲基蓝次甲基蓝 v仪器:仪器:离心机,水浴箱,离心机,水浴箱,电炉,电炉,量筒,离心管,注量筒,离心管,注射器,试管,移液管,烧射器,试管,移液管,烧杯,杯,吸管,载玻片,盖玻吸管,载玻片,盖玻片,显微镜片,显微镜第4页,本讲稿共10页四、实验步骤四、实验步骤 v1.鸡血红细胞悬液的制备:鸡血红细胞悬液的制备:v用注射器吸入用注射器吸入 1mL Alsver液后从鸡翼下静脉取鸡血液后从鸡翼下静脉取鸡血2mL,注,注 入刻度离心管内,按照入刻度离心管内,按照3:1(V/V)加入加入6
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- 关 键 词:
- 实验 诱导 细胞融合 聚乙二醇
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