《临床免疫学检验技术》课程实验教学大纲.docx
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1、临床免疫学检验技术课程实验教学大纲课程代码:32061031a课程名称:临床免疫学检验技术适用专业:医学检验技术课程类别:必修开课学期:第六学期实验学时:44学 分:5一、开课实验室医学影像与检验实验室二课程性质与任务课程性质:临床免疫学检验技术是应用免疫学理论与技术研究疾病的发 生机制、免疫学诊断、治疗和预防的学科,是医学检验技术专业的一门主干课和 专业课。课程任务:通过学习使学生具有扎实的基础理论和临床实践技能,为以后从 事科研工作及临床检验工作并对临床检验结果的正确分析打下坚实基础,使学生 具有一定的的临床应用思维分析能力和对疾病的诊断及防治能力,同时培养学生 具有较强的动手能力和一定的
2、科研能力。三、教学目的和要求1 .掌握常用免疫学技术和免疫检验方法的原理、操作、结果判定、质量控制 及方法学评价。2 .熟悉临床应用思维分析能力和对疾病的诊断及防治能力,3.提高学生具有较强的动手能力和一定的科研能力,解决临床免疫检验相关 实际问题。四 考核形式要求实验成绩100分记,实验考核占总成绩20虬五、实验项目名称与学时分配序号实验项目名称实验 类型实验 学时每组 人数实验要求 (必做或选做)1免疫原和抗血清的制备综合1012必做2凝集试验验证412必做3沉淀试验验证412必做4酶联免疫吸附试验验证412必做5化学发光免疫分析验证412必做6固相膜免疫测定验证412必做7免疫细胞分离验
3、证412必做8免疫细胞功能检测验证212必做9补体检测设计412必做10实验考核综合412必做六实验项目的具体内容实验一免疫原和抗血清制备1、实验目的和要求(1)掌握免疫血清制备的原理和方法(2)熟悉颗粒性抗原和可溶性抗原的抗血清制备方法2、实验原理应用颗粒性抗原如致病菌、非致病菌、红细胞等或可溶性抗原如人全血清等 反复多次注射到动物体内,使之产生免疫应答,在体内产生高效价的特异性抗体, 然后采集经免疫动物的血液制备血清,此即含有特异性抗体的免疫血清,可用于 血清学诊断和病原体鉴定。本实验以细菌菌体抗原及人全血清的免疫血清制备为 例,说明免疫血清制备的过程。3、材料试剂2-3公斤家兔、伤寒杆菌
4、标准菌株、人全血清、0.4%甲醛生理盐水、消毒用 碘酒、酒精、无菌棉签、无菌注射器、试管、研钵等 4、实验步骤(1)领取2-3公斤左右健康雄兔,测体温、呼吸、心跳三天(2)抗原制备 伤寒杆菌O-Ag制备、伤寒杆菌H-Ag制备、人全血清抗原 制备(3)免疫方案颗粒性抗原抗血清制备(0)-Ag或H-Ag)可溶性抗原抗血清制备(4)放血心脏取血(5)保存离心血清,4c保存备用。5、教学方式老师讲解、示教+学生互相操作,老师指导6、考核要求随机抽查二组学生,检查操作的准确性并纠正操作中的错误。7、实验报告要求要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。实验二凝集试验1、实验目的和要求(1
5、)掌握玻片凝集试验(定性)的原理、操作方法及医学意义。(2)掌握试管凝集试验(半定量)的原理、操作方法及医学意义。(3)掌握胶乳凝集试验的方法及应用。2、实验原理颗粒性抗原与相应抗体在适当条件下发生反应,出现肉眼可见的凝集小块, 称为直接凝集反应。类风湿因子(RF)是一种抗变性IgG的抗体。聚苯乙烯胶乳颗粒具有很强 的吸附蛋白质的能力,借此将抗原(IgG)与胶乳颗粒结合成致敏颗粒,直接与 待测标本中的抗体(RF)发生凝集反应。3、材料试剂诊断血清、生理盐水、待检细菌的平板培养物、待检血清、伤寒杆菌“0” 和“H”抗原悬液、类风湿因子检测试剂、载玻片、接种环、恒温水浴箱、试管 架、试管、吸管。4
6、、实验内容玻片凝集试验(定性):试管凝集试验(半定量):胶乳凝集试验:5、教学方式老师讲解、示教+学生互相操作,老师指导6、考核要求随机抽查二组学生,检查操作的准确性并纠正操作中的错误。7、实验报告要求要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。实验三沉淀实验1、实验目的和要求(1)掌握琼脂扩散实验的原理、操作方法及医学意义。(2)单扩试验中Mancini曲线和Fehcy曲线的绘制,计算标本含量。2、实睑原理可溶性抗原与相应抗体分别放入凝胶内进行扩散,二者在比例合适的位置形 成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。3、材料试剂羊抗人IgG诊断血清(2国际单位/ml)、人免疫球蛋白工作标准(I
7、gG含量 11.66mg/ml)有商品出售、琼脂糖或琼脂粉、生理盐水、待测人血清、载玻片、 三角烧瓶、吸管、10ul微量吸管、加样器、打孔器、水浴箱、湿箱、湿盒、水平 台、测量尺、圆规、半对数坐标纸等。4、5、实验内容琼脂凝胶准备:浇板:打孔:加样:扩散:结果计算:教学方式6、7、考核要求随机抽查二组学生, 实验报告要求要求书写实验目的、检查操作的准确性并纠正操作中的错误。实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。老师讲解、示教+学生互相操作,老师指导实验四酶联免疫吸附试验1、2、实验目的和要求掌握ELISA原理、操作方法及应用。实验原理采用抗-HBs包被反应板,加入待测标本,同时加入抗-HBs
8、-HRP,当标本 中存在HBsAg时,该HBsAg与包被抗-HBs结合并与抗-HBs-HRP结合形成 抗-HBs-HBsAg-抗-HBs-HRP复合物,加入TMB底物产生显色反应,反之则无 显色反应。3、材料试剂ELISA试剂盒4、实验内容实验准备:加待测标本:加酶标结合物:加显色剂:终止反应:测定:5、教学方式老师讲解、示教+学生互相操作,老师指导6、考核要求随机抽查二组学生,检查操作的准确性并纠正操作中的错误。7、实验报告要求要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。实验五化学发光免疫分析1、实验目的和要求(1)掌握化学发光免疫分析的原理。(2)熟悉化学发光免疫分析仪器的操
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