医学专题—使巨噬细胞转变为类上皮细胞24202.ppt
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1、第十三章分枝杆菌属 是一类细长略带弯曲的杆菌,含有分枝菌是一类细长略带弯曲的杆菌,含有分枝菌酸,有分枝生长的趋势而得名。具有抗酸酸,有分枝生长的趋势而得名。具有抗酸性,一般不易着色,经加温性,一般不易着色,经加温(ji wn)(ji wn)或延长时或延长时间才能着色,着色后能抵抗盐酸酒精的脱间才能着色,着色后能抵抗盐酸酒精的脱色作用,故又称抗酸杆菌,归属于放线菌色作用,故又称抗酸杆菌,归属于放线菌科,已鉴定的有科,已鉴定的有7070余种。余种。第一页,共三十页。第一节结核(jih)分枝杆菌 包括人结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分包括人结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌等,其中
2、前三者对人枝杆菌和田鼠分枝杆菌等,其中前三者对人类致病。人型结核分枝杆菌感染的发病率最类致病。人型结核分枝杆菌感染的发病率最高。高。由由于于AIDSAIDS发发病病率率呈呈上上升升趋趋势势,而而AIDSAIDS极极易易患患结结核核病病,因因此此更更使使得得结结核核病病成成为为危危胁胁人人类类健健康的一个严重康的一个严重(ynzhng)(ynzhng)的全球性公共卫生问题的全球性公共卫生问题。第二页,共三十页。一、临床意义一、临床意义(一一)致病物质是荚膜、脂质和蛋白质。致病物质是荚膜、脂质和蛋白质。1 1荚膜有助于粘附,能防止有害物质进入结荚膜有助于粘附,能防止有害物质进入结 核分枝杆菌,还可
3、抑制吞噬体与溶酶体融核分枝杆菌,还可抑制吞噬体与溶酶体融 合。合。2.2.蛋白质蛋白质 有抗原性,和蜡质有抗原性,和蜡质D D结合后能使结合后能使 机体发生超敏反应,并在形成机体发生超敏反应,并在形成(xngchng)(xngchng)结核结结核结节中节中 发挥作用。发挥作用。第三页,共三十页。3 3脂质脂质 毒力与所含的脂质,尤其是糖脂更为重要。毒力与所含的脂质,尤其是糖脂更为重要。索状因子是分枝菌酸和海藻糖结合的一种糖索状因子是分枝菌酸和海藻糖结合的一种糖脂,能损伤细胞线粒体和抑制氧化磷酸化过脂,能损伤细胞线粒体和抑制氧化磷酸化过程,抑制粒细胞的游走程,抑制粒细胞的游走(yu zu)(yu
4、 zu),引起慢性肉芽,引起慢性肉芽肿。肿。磷脂能促进单核细胞增生,使巨噬细胞转变磷脂能促进单核细胞增生,使巨噬细胞转变为类上皮细胞,从而形成结节。为类上皮细胞,从而形成结节。第四页,共三十页。硫酸脑甘酯是有毒株细胞壁的成分,能抑制硫酸脑甘酯是有毒株细胞壁的成分,能抑制溶酶体同吞噬体的结合,使细菌在细胞内长溶酶体同吞噬体的结合,使细菌在细胞内长期存活期存活(cn hu)(cn hu)。蜡质蜡质D D:有佐剂作用,激发机体产生迟发型超:有佐剂作用,激发机体产生迟发型超敏反应。敏反应。第五页,共三十页。(二二)所致所致(su zh)疾病疾病 通通过过呼呼吸吸道道、消消化化道道和和损损伤伤的的皮皮肤
5、肤等等多多途途径径感感染染机机体体,引引起起多多种种脏脏器器的的结结核核病病,其其中中以以肺肺结结核核为为多多见见。细细菌菌能能够够(nnggu)在在巨巨噬噬细胞内繁殖。为细胞内寄生菌。细胞内繁殖。为细胞内寄生菌。第六页,共三十页。结结核核的的免免疫疫为为有有菌菌免免疫疫或或称称传传染染性性免免疫疫,指指机机体体对对细细菌菌再再次次入入侵侵有有免免疫疫力力。细细胞胞免免疫疫在在抗抗感感染染免免疫疫中中起起重重要要(zhngyo)作作用用,产产生生细细胞胞免免疫的同时,也产生迟发型超敏反应。疫的同时,也产生迟发型超敏反应。第七页,共三十页。二、微生物特性二、微生物特性(txng)1.为为分分枝枝
6、状状,略略带带弯弯曲曲的的抗抗酸酸杆杆菌菌,加加温温苯苯胺胺染染料料染染色色后后不不易易被被3 3盐盐酸酸酒酒精精脱脱色色,抗抗酸酸性性染染色色法法染染色色后后结结核核分分枝枝杆杆菌菌呈呈红红色色,背背景景呈呈蓝蓝色色。菌体外有荚膜。菌体外有荚膜。2.2.菌体含有脂质、多糖和蛋白质等成分。与菌体含有脂质、多糖和蛋白质等成分。与 致病性免疫性有关。致病性免疫性有关。3.3.细细胞胞壁壁骨骨架架(gji)(gji)、蜡蜡质质D D和和核核酸酸等等均均有有佐佐剂剂作作用。用。第八页,共三十页。4.4.为专性需氧,为专性需氧,3 355CO2CO2能促进生长。营能促进生长。营养要求较高,必须在含血清养
7、要求较高,必须在含血清(xuqng)(xuqng)、卵黄、卵黄、甘油以及含某些无机盐类的特殊培养基才甘油以及含某些无机盐类的特殊培养基才能生长良好。最适生长温度为能生长良好。最适生长温度为3535,生长,生长缓慢,缓慢,1418h1418h分裂分裂1 1次,次,25w 25w才出现肉才出现肉眼可见的如菜花样粗糙型菌落。眼可见的如菜花样粗糙型菌落。第九页,共三十页。5.5.抵抵抗抗力力 对对理理化化因因素素抵抵抗抗力力较较强强。耐耐干干燥燥,在在干干燥燥的的痰痰内内生生存存6 68 8个个月月,对对化化学学消消毒毒剂剂的的抵抵抗抗力力较较强强,在在3 3HClHCl或或6 6H2SO4H2SO4
8、中中不不被被杀杀死死,常常用用于于处处理理有有杂杂菌菌污污染染的的检检材材,对对湿湿热热敏敏感感(mngn)(mngn),6030min6030min可可杀杀死死细细菌菌,在在70707575乙醇中数分钟即被杀死。乙醇中数分钟即被杀死。第十页,共三十页。三、微生物学三、微生物学(wi shn w xu)检验检验 1标标本本:清清晨晨第第一一口口痰痰送送检检。无无菌菌抽抽取取脑脑脊脊液液、胸胸水水、腹腹水水(fshu)(fshu)及及关关节节液液等等盛盛无无菌菌试试管管送送检检,脑脑脊脊液液标标本本静静置置后后,表表面面有有细细薄薄凝凝块块,取取凝凝块块作作涂涂片片或或接接种种培培养养。采采集集
9、脓脓液液应应直直接接从溃疡处取脓汁或分泌物。从溃疡处取脓汁或分泌物。第十一页,共三十页。2 2直直接接涂涂片片染染色色镜镜检检:是是常常用用的的简简易易快快速速检检查查方方法法。痰痰涂涂片片要要厚厚,经经自自然然干干燥燥和和火火焰焰固固定定后后进进行行齐齐-尼尼抗抗酸酸染染色色,观观察察至至少少100100个个视视野野,结结核核分分枝枝杆杆菌菌抗抗酸酸染染色色后后呈呈红红色色,其其他他细细菌菌和和细细胞胞为为蓝蓝色色。结结果果应应报报告告(bogo)(bogo)“找找到到或或未未找找到到抗抗酸酸性性杆杆菌菌”,而而不不能能报报告告“找找到到结结核分枝杆菌核分枝杆菌”。第十二页,共三十页。3.3
10、.核酸检测核酸检测 用用PCRPCR法法快快速速诊诊断断结结核核分分枝枝杆杆菌菌感感染染。设设计计特特异异rRNArRNA片片段段进进行行扩扩增增,然然后后用用特特异异的的DNADNA探针与之杂交。特异性与敏感性均大于探针与之杂交。特异性与敏感性均大于9595。4.4.抗抗PPDIgGPPDIgG的检测的检测 用用ELISAELISA法法检检测测患患者者(hunzh)(hunzh)血血清清中中抗抗PPDIgGPPDIgG,可可作作为为活活动动性性结结核核分分枝枝杆杆菌菌感感染染的的快快速速诊诊断断方法,阳性率为方法,阳性率为80809090。第十三页,共三十页。5.分离分离(fnl)培养培养
11、脑脑脊脊液液、胸胸腹腹水水等等无无杂杂菌菌污污染染的的标标本本可可直直接接或或离离心心后后取取沉沉渣渣接接种种等等有有杂杂菌菌污污染染的的标标本本在在接接种种到到培培养养基基之之前前须须做做适适当当的的处处理理,以以消消除除杂菌的干扰。杂菌的干扰。标标本本接接种种于于选选择择性性固固体体培培养养基基中中,常常用用罗罗琴琴培培养养基基,所所含含的的孔孔雀雀绿绿或或青青霉霉素素可可抑抑制制杂杂菌菌生生长长:3737,5 51010COCO2 2培培养养8 8周周,如如果果出出现现干干燥燥呈呈颗颗粒粒状状、灰灰白白色色菌菌落落,涂涂片片(t(t pin)pin)染染色色为为抗抗酸酸阳阳性性,多多数数
12、是是结结核核分分枝枝杆杆菌菌。阴阴性性继续培养至继续培养至1212周方可报告。周方可报告。第十四页,共三十页。6.鉴定鉴定(jindng)菌菌种种鉴鉴定定可可为为结结核核病病和和非非典典型型分分枝枝杆杆菌菌病病的的临床鉴别和防治提供科学的依据。临床鉴别和防治提供科学的依据。(1)PCR(1)PCR反反向向(fn(fn xin)xin)膜膜探探针针杂杂交交EHSAEHSA法法(PCR(PCR杂杂交交梳梳):该该法法是是将将PCRPCR、分分子子杂杂交交、酶酶联联免免疫疫显显色色技技术术有有机机结结合合,经经过过两两次次特特异异性性双双向向选选择择,其其特特异异性性相相互互补补充充和和加加强强,对
13、对提提高高方方法法的的特特异异性性,消除假阳性起决定作用。消除假阳性起决定作用。第十五页,共三十页。(2)DNA(2)DNA探探针针:使使用用对对分分枝枝杆杆菌菌rRNArRNA序序列列特特异异的的DNADNA探探针针与与分分枝枝杆杆菌菌rRNArRNA杂杂交交,由由于于每每个个分分枝枝杆杆菌菌细细胞胞(xbo)(xbo)内内有有1010,000000个个rRNArRNA拷拷贝贝,故故为为杂杂交交提提供供了了放放大大系系统统,提提高高了了灵灵敏敏度度,将将荧荧光素或同位素标记在探针上,可鉴定菌种。光素或同位素标记在探针上,可鉴定菌种。第十六页,共三十页。(3)16s(3)16s rRNArRN
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- 医学 专题 巨噬细胞 转变为 上皮细胞 24202
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