最新实验1-1MS培养基母液和常用试剂的配制PPT课件.ppt
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1、实验1-1MS培养基母液和常用试剂的配制实验内容:实验内容:实验1-1 MS培养基母液和常用试剂的配制实验1-2 马铃薯试管苗快速繁殖培养基的配制实验1-3 马铃薯试管苗的快速繁殖实验1-4 马铃薯试管薯的诱导如果没有培养基干粉,则可采用以下两种方法来配制:一个是按照配方规定的数量分别称量出各种成分,分别使它们溶解于水,然后再将它们混合在一起。另一个是先配制一系列的浓缩贮备液(母液),贮存在24冰箱内,待配培养基时取出,按比例稀释配用。此法较为常用。5.3 MS 培养基母液的配制培养基母液的配制母液的配制有两种方法:一种是配制成单一化合物母液。此法适合配制多种培养基都需要的同一种母液。另一种是
2、配成几种不同化合物的混合母液。此法在大量配制同种培养基时省时省力。由于MS 培养基较为常用,故配制MS 培养基母液。配好的母液应放在试剂瓶中贮存。在配制MS培养基母液时,为减少工作量可以把几种药品(如培养基中的大量元素或微量元素)配在同一母液中,但应注意各注意各种化合物的组合以及加入的先后顺序,种化合物的组合以及加入的先后顺序,以免发生沉淀。通常把每种试剂单独溶解后再与别的也已完全溶解的药品混合,或者待前一种化合物完全溶解后再加入后一种化合物。混合已溶解的各种矿质盐时还应注意先后顺序,力求把力求把Ca2+与与SO42-和和PO43-错开,错开,以免形成硫酸钙或磷酸钙的不溶物。同时,要慢慢地混合
3、,边混合边搅拌。5.3.1 5.3.1 大量元素母液的配制大量元素母液的配制MS培养基中的9种大量元素除C、H、O外,剩下的六种可由KNO3、NH4NO3、CaCl2 2H20、MgSO4 7H2O、KH2PO4几种无机盐来供应,它们可配在同一母液中(具体配制见下表)。配制的步骤为:确定母液的浓度和体积计算各种化合物用量称量分别溶解混合定容装瓶贴标签放入冰箱保存。注意:CaCl2 2H20最后加入最后加入母母液液种种类类 成成 分分 规定规定用量用量/mg/mg L L-1-1 扩扩大大倍倍数数 称取量称取量/mg/mg 母液母液定容定容体积体积/ml/ml 配配1L 1L MSMS培养培养基
4、吸取基吸取取量取量/ml/ml 大大量量元元素素 KNO319002020 3800010001000 5050 NH4NO3165033000CaCl2 2H204408800MgSO4 7H2O3707400KHKH2 2POPO4 4 170170 34003400 5.3.2 5.3.2 微量元素母液的配制微量元素母液的配制MS培养基中的微量元素可由MnSO4 4H2O、ZnSO4 7H2O、H3BO3、KI、Na2MoO4 2H2O、CuSO4 5H2O、CoCl2 6H2O几种无机盐来供应,它们也可配在同一母液中(具体配制见下表)。配制步骤同大量元素(混合时不要求先后顺序)。母母液
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