微生物学实验常用培养基的配制培训讲学.doc
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1、Good is good, but better carries it.精益求精,善益求善。微生物学实验常用培养基的配制-牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂1520gpH7.07.2水1000mL121灭菌20min。2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH7.27.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。121灭菌20min。3、查氏(Czapek)培养基
2、(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂1520g水1000mLpH自然121灭菌20min。4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红(rosebengal,玫瑰红水溶液)100mL琼脂1520gpH自然蒸馏水800mL112灭菌30min。临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30g。5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂1520gpH自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸
3、30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。121灭菌30min。6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水612小时,至15阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65水浴中糖化34小时,糖化程度可用碘滴定之。加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。(3)、将糖化液用46层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸
4、后再过滤。(4)、将滤液稀释到56波美度,pH约6.4,加入2%琼脂即成。121灭菌30min。7、无氮培养基(自生固氮菌、钾细菌)甘露醇(或葡萄糖)10g磷酸二氢钾0.2g七水合硫酸镁0.2g氯化钠0.2g二水合硫酸钙0.2g碳酸钙5g蒸馏水1000mLpH7.07.2113灭菌30min。8、半固体肉膏蛋白胨培养基肉膏蛋白胨液体培养基100mL琼脂0.350.4gpH7.6121灭菌20min。9、合成培养基偏磷酸铵1g氯化钾0.2g七水合硫酸镁0.2g豆芽汁10mL琼脂20g蒸馏水1000mLpH7.0加12mL0.04%的溴钾酚紫(pH5.26.8,颜色由黄变紫,作指示剂)。121灭菌
5、20min。10、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基黄豆芽100g蔗糖(或葡萄糖)50g水1000mLpH自然培养基的配制:称新鲜豆芽100g,放入烧杯中,加入水1000mL,煮沸约30min,用纱布过滤。用水补足原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50g,煮沸熔化。121灭菌20min。11、油脂培养基蛋白胨10g牛肉膏5g氯化钠5g香油或花生油10g1.6%中性红水溶液1mL琼脂1520g蒸馏水1000mLpH7.2121灭菌20min注:(1)、不能使用变质油。(2)、油和琼脂及水先加热。(3)、调好pH值后,再加入中性红。(4)、分装时,需不断搅拌,使油均匀分布于培养基中。12、淀粉培养基蛋白胨10
6、g牛肉膏5g氯化钠5g可溶性淀粉2g蒸馏水1000mL琼脂1520g121灭菌20min13、明胶培养基牛肉膏蛋白胨液100mL明胶1218gpH7.6在水浴锅中将上述成分溶化,不断搅拌。溶化后调pH7.27.4。121灭菌30min。14、蛋白胨水培养基蛋白胨10g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.6121灭菌20min。15、糖发酵培养基蛋白胨水培养基1000mL1.6%溴钾酚紫乙醇溶液12mLpH7.6另配制20%糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各10mL。培养基的配制:(1)、将上述含指示剂的蛋白胨水培养基(pH7.6)分装于试管中,在每管内放一倒置的小玻璃管(Durhamtube),
7、使之充满培养液。(2)、将已分装好的蛋白胨水和20%的各种糖溶液分别灭菌,蛋白胨水121灭菌20min;糖溶液112灭菌30min。(3)、灭菌后,每管以无菌操作分别加入20%无菌糖溶液0.5mL(按每10mL培养基中加入20%的糖液0.5mL,则成1%的浓度)。配制用的试管必须洗干净,避免结果混乱。16、葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨5g葡糖糖5g磷酸氢二钾2g蒸馏水1000mL将上述各成分溶于1000mL水中,调pH7.07.2,过滤。分装试管,每管10mL,112灭菌30min。17、麦氏(Meclary)琼脂(酵母菌)葡萄糖1g氯化钾1.8g酵母浸膏2.5g醋酸钠8.2g琼脂1520g蒸馏
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