(通用版)高考生物大二轮专题复习与增分策略 专题16 基因工程和细胞工程课件-人教版高三全册生物课件.ppt
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1、专题16基因工程和细胞工程1.基因工程的诞生()。2.基因工程的原理及技术(含PCR)()。3.基因工程的应用()。4.蛋白质工程()。5.植物的组织培养()。6.动物的细胞培养与体细胞克隆()。7.细胞融合与单克隆抗体()。重温考纲要求内容索引基础自查排查考点夯实基础热点梳理突破热点梳理关键基础自查排查考点夯实基础自建知识体系答案DNA连接酶基因表达载体的构建基因细胞的全能性、细胞膜的流动性细胞增殖动物细胞核的全能性给小鼠注射抗原产生专一抗体的杂交瘤细胞1.基因工程的相关判断基因工程的相关判断(1)携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检测()(2)转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过
2、分子检测()(3)一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列()(4)用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸()(5)每个重组质粒至少含有一个限制性核酸内切酶识别位点()(6)自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上,属于基因工程()自查知识缺漏答案(7)转抗虫基因的植物,不会导致昆虫群体抗性基因频率增加()(8)重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子中脱氧核糖和磷酸交替连接()(9)应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达()(10)动物的生长激素基因转入植物后不能表达()答案2.细胞工程的相关判断细胞工程的相关判断
3、(1)产生抗人白细胞介素8抗体的杂交瘤细胞的筛选必须通过分子检测()(2)21三体综合征的诊断必须通过分子检测()(3)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是组织培养()(4)去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理()(5)乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养()(6)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞()(7)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体体现了细胞的全能性()(8)体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体()(9)单克隆抗体技术可用于治疗老年痴呆症()(10)细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行()答案返回热点梳理突破热点梳理关键一、基因工程二、细
4、胞工程返回1.(2016全国乙,40)某一质粒载体如图所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH酶切后,与用BamH酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌,结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:一、基因工程 真题回放11234512345(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有_(答出两点即可),而作为基因表达载体
5、,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。解解析析作为载体必须具备如下特点:能自我复制,从而在受体细胞中稳定保存;含标记基因,以供重组DNA的鉴定和选择;具一个至多个限制性核酸内切酶切割位点以便外源DNA片段插入。能自我复制、具有标记基因解析答案12345(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是_;并且_和_的细胞也是不能区分的,其原因是_。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有_的固体培养基。二者均不含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均不生长插入了目
6、的基因的重组质粒(或答含有重组质粒)二者均含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长四环素含有质粒载体含有答案解析12345(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自于_。解解析析噬菌体是病毒,无细胞结构,无法自主合成DNA,需借助宿主细胞完成DNA复制。解析答案受体细胞2.(2016全国丙,40)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoR、BamH和Sau3A三种限制性核酸内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoR、Sau3A的切点是唯一的)。根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)经BamH酶切后得到的目的基因
7、可以与上述表达载体被_酶切后的产物连接,理由是_。答案12345Sau3A两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端解析12345(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子,如图(c)所示。这三种重组子中,不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有_,不能表达的原因是_。甲和丙甲中目的基因插入在启动子的上游,丙中目的基因插入在终止子的下游,二者的目的基因均不能被转录答案解析12345(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有_和_,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是_。解解析析常见的DNA连接酶有EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶,其中既能
8、连接黏性末端又能连接平末端的是T4DNA连接酶。EcoliDNA连接酶T4DNA连接酶T4DNA连接酶解析答案12345解析答案3.(2015全国,40)HIV属于逆转录病毒,是艾滋病的病原体。回答下列问题:(1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时,可先提取HIV中的_,以其作为模板,在_的作用下合成_,获取该目的蛋白的基因,构建重组表达载体,随后导入受体细胞。解解析析HIV是RNA病毒,其核酸是单链RNA,而在基因工程中构建目的基因表达载体时,载体一般用的是质粒,为双链DNA,故先用逆转录酶催化HIV的RNA逆转录为DNA分子再进行基因工程操作。12345(2)从受体细胞中分离纯
9、化出目的蛋白,该蛋白作为抗原注入机体后,刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是_,该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV,检测的原理是_。解解析析本题涉及到了免疫学方面知识,抗原进入机体后可以产生特异性免疫反应,产生相应的抗体,抗体与抗原特异性结合。(3)已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见,但是在艾滋病患者中却多发。引 起 这 种 现 象 的 根 本 原 因 是 HIV主 要 感 染 和 破 坏 了 患 者 的 部 分_细胞,降低了患者免疫系统的防卫功能。解析解析HIV病毒主要攻击人体的T细胞。抗体抗原抗体特异性结合T(或T淋巴)解析答案12345(4)人的免疫系统有_癌细胞的功能。
10、艾滋病患者由于免疫功能缺陷,易发生恶性肿瘤。解解析析免疫系统除了具有防卫功能外,还有监控和清除功能:监控并清除体内已经衰老或因其他因素而被破坏的细胞,以及癌变的细胞。监控和清除解析答案123454.(2014新课标全国,40)植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题:(1)理论上,基因组文库含有生物的_基因;而cDNA文库中含有生物的_基因。解解析析基因组文库包含某种生物的全部基因,而cDNA文库中包含生物的部分基因。全部部分解析答案12345(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植
11、物的基因组文库,再从中_出所需的耐旱基因。解解析析植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关,若要从植物甲中获得耐旱基因,首先应建立该植物的基因组文库,然后再从中筛选出所需的耐旱基因。解析答案筛选12345(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物_的体细胞中,经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的_,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的_是否得到提高。解解析析从植物甲中获得该耐旱基因后,将其转移到耐旱性低的植物乙中,通常采用的方法是农杆菌转化法。将耐旱基因导入植物乙的体细胞后,经过植物组织培养得到再生植株
12、。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测该耐旱基因是否合成了相应的蛋白质,即检测此再生植株中该基因的表达产物,如果检测结果呈阳性,说明已经合成了相应的蛋白质,这时再进行个体生物学检测,即在田间试验中检测植株的耐旱性是否得到提高。乙表达产物耐旱性解析答案12345(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为31时,则可推测该耐旱基因整合到了_(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。解解析析假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱和不耐旱植株的数量比为31,符合基因的分离定律,说明得到的二倍体转基因耐旱植株为杂合子,因此可推测该耐旱基
13、因整合到了同源染色体的一条上。同源染色体的一条上解析答案解析答案123455.(2015全国,40)已知生物体内有一种蛋白质(P),该蛋白质是一种转运蛋白,由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸,240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸,改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性。回答下列问题:(1)从上述资料可知,若要改变蛋白质的功能,可以考虑对蛋白质的_进行改造。解解析析对蛋白质的氨基酸序列(或结构)进行改造,可达到改变蛋白质功能的目的。序列(或结构)(其他答案合理也可)氨基酸解析答案12345(2)以P基因序列为基础,获得P1基因的途径有修饰_基因或合成
14、_基因。所获得的基因表达时是遵循中心法则的,中心法则的全部内容包括_的复制,以及遗传信息在不同分子之间的流动,即:_。解解析析以P基因序列为基础,获得P1基因,可以对P基因进行修饰改造,也可以用人工方法合成P1基因;中心法则的全部内容包括,即:DNA、RNA的复制、DNARNA、RNADNA、RNA蛋白质(或转录、逆转录、翻译)。PP1RNA(或遗传物质)DNA和DNARNA、RNADNA、RNA蛋白质(或转录、逆转录、翻译)解析答案12345(3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过_和_,进而确定相对应的脱氧核苷酸序列,据此获得基因,再经表达、纯化获得蛋
15、白质,之后还需要对蛋白质的生物_进行鉴定。解解析析蛋白质工程的基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过设计蛋白质结构和推测氨基酸序列,推测相对应的脱氧核苷酸序列,并获取基因。经表达的蛋白质,要对其进行生物功能鉴定。设计蛋白质的结构推测氨基酸序列功能悟规律1.理清基因工程理清基因工程3种操作工具的作用与特点种操作工具的作用与特点答案 核心提炼2项目限制酶DNA连接酶载体作用切割_拼接DNA片段,形成_携带目的基因进入_作用部位两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键目的基因和载体重组DNA分子受体细胞答案作用特点(条件)识别特定的核苷酸序列;在特定位点上切割DNA分子 连接酶只能连接黏性末端;连接
16、酶能连接黏性末端和平末端 能在宿主细胞内稳定存在并大量;有一个至多个;具有特殊的_EcoliDNAT4DNA复制限制酶切割位点标记基因答案2.掌握获取目的基因的掌握获取目的基因的3种途径种途径(1)直接分离:从自然界已有的物种中分离,如从中获取。(2)人工合成目的基因(常用方法如下)化学合成法:已知核苷酸序列的较小基因,直接利用用化学方法合成,不需要模板。人工合成法:以为模板,在的作用下人工合成。(3)利用技术扩增。基因文库DNA合成仪RNA逆转录酶PCR答案3.牢记基因表达载体的构建牢记基因表达载体的构建(1)基因表达载体的组成:目的基因启动子终止子复制原点。(2)启动子和终止子:启动子是识
17、别和结合的部位,启动转录;终止子是的位点。(3)基因表达载体的构建过程标记基因RNA聚合酶终止转录答案4.将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法法、基因枪法、花粉管通道法等技术法(Ca2处理法)受体细胞体细胞受精卵原核细胞5.理清目的基因的检测与鉴定理清目的基因的检测与鉴定(1)导入检测:杂交技术(使用DNA探针)(3)个体生物学水平鉴定:如对转基因作物进行抗虫或抗病等的接种实验。农杆菌转化显微注射感受态细胞DNA分子分子杂交抗原抗体1.某农科院开展“转基因抗虫棉”的科技研究,成功地将某种能产生抗虫毒蛋白的抗虫基因导入棉花细胞中,得到的棉花新品种
18、对棉铃虫的毒杀效果高达80%以上。下图为培育这种抗虫棉的示意图,请回答下列问题:题型集训3123(1)基因工程的四个基本步骤是_、基因表达载体的构建、_和_。将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是_。解解析析基因工程的四个基本步骤为:目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞(即转化)以及目的基因的检测与鉴定。将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法,此外还有基因枪法和花粉管通道法等。解析答案目的基因的获取将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定农杆菌转化法123(2)Ti质粒原存在于农杆菌的_(填细胞结构)中,其上的TDNA可转移至受体细胞并整合到受体细胞_上,因此携
19、带外源基因的DNA片段必须插入到_(部位)。解解析析Ti质粒存在于农杆菌的细胞质中,其上的TDNA可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体的DNA上。(3)将抗虫棉植株的细胞通过_技术可获得高产的抗虫棉植株。解解析析将含有目的基因的棉花细胞培养成一完整植株,该过程涉及的现代生物学技术是植物组织培养。解析答案细胞质染色体的DNATDNA片段(内部)植物组织培养123(4)若在获取含目的基因的DNA片段时,使用了EcoR,这种酶切割DNA的两条链后,产生的是_末端,这种酶催化断裂的化学键是_。解解析析EcoR是一种限制酶,该酶切割DNA的两条链后,产生的是黏性末端,其催化断裂的化学键是磷酸二酯键。黏
20、性磷酸二酯键解析答案1232.科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高。如图1是转基因抗冻番茄培育过程的示意图,图2为质粒限制酶酶切图谱。鱼的抗冻蛋白基因不含图中限制酶识别序列,Ampr为抗氨苄青霉素基因,其中是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤,、表示相关结构或细胞。请据图回答下列问题:123(1)获取鱼的抗冻蛋白基因途径主要有_。为了使番茄获得抗冻蛋白必须将抗冻蛋白基因连接在质粒中的_之后。图中、依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的_过程。细胞中分离和化学方法人工合成从体启动子脱分化、再分化答案解析123(2)在构建基因表达载体时,可用一种或者多种限制酶进行切割。该酶的特点
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