食品理化检验化学性食物中毒快速检测.ppt
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1、LOGO食品理化检验食品理化检验食品科学学院龚玉石龚玉石LOGO化学性食物中毒的快速检测化学性食物中毒的快速检测【掌握掌握】n食物中毒的定义食物中毒的定义n毒物快速鉴定的程序毒物快速鉴定的程序n水溶性毒物的提取方法,格氏法快速检验亚硝酸盐的原水溶性毒物的提取方法,格氏法快速检验亚硝酸盐的原理和方法理和方法n挥发性毒物的分离方法,氰化物的毒性和采样要点,普挥发性毒物的分离方法,氰化物的毒性和采样要点,普鲁士蓝法快速鉴定氰化物的原理和操作要点鲁士蓝法快速鉴定氰化物的原理和操作要点n斯斯-奥氏法的原理和操作要点奥氏法的原理和操作要点n雷因许氏法雷因许氏法n快速鉴定有机磷农药的原理和方法快速鉴定有机磷
2、农药的原理和方法n河豚毒素的毒性及其快速鉴定的方法河豚毒素的毒性及其快速鉴定的方法【熟悉熟悉】n化学性毒物的分类化学性毒物的分类n不挥发性毒物的分类和提取分离方法,简易不挥发性毒物的分类和提取分离方法,简易提取法,巴比妥类及生物碱类毒物的特点及提取法,巴比妥类及生物碱类毒物的特点及检验方法检验方法n确证汞、砷的试验方法,钡的快速检验法确证汞、砷的试验方法,钡的快速检验法n常见灭鼠药的性质及快速鉴定方法常见灭鼠药的性质及快速鉴定方法n快速鉴定毒蕈的方法快速鉴定毒蕈的方法【了解了解】n亚硝酸盐中毒的特点亚硝酸盐中毒的特点n常见挥发性毒物的种类,苦味酸试纸法和对硝常见挥发性毒物的种类,苦味酸试纸法和
3、对硝基甲醛法基甲醛法n金属毒物引起食物中毒的概况金属毒物引起食物中毒的概况n农药中毒的概况,鼠药中毒的概况农药中毒的概况,鼠药中毒的概况n河豚毒素的毒性河豚毒素的毒性n快速检验食物中毒的方法,有毒动植物中毒的快速检验食物中毒的方法,有毒动植物中毒的概况概况LOGO主要内容主要内容水溶性毒物水溶性毒物1挥发性毒物挥发性毒物2灭灭 鼠鼠 药药6不挥发性有机毒物不挥发性有机毒物3金属毒物金属毒物4农农 药药5有毒动植物有毒动植物7LOGO化学性食物中毒的概念化学性食物中毒的概念 是指摄入了含有化学性有毒有害是指摄入了含有化学性有毒有害物质的食品或者把有毒有害物质当物质的食品或者把有毒有害物质当作食品
4、摄入后出现的非传染性的,作食品摄入后出现的非传染性的,以急性或亚急性中毒症状为主的疾以急性或亚急性中毒症状为主的疾病。病。LOGO1、发病快。潜伏期较短,多以急性胃肠、发病快。潜伏期较短,多以急性胃肠炎症状为主;炎症状为主;2、中毒程度严重,病程长,发病率和死、中毒程度严重,病程长,发病率和死亡率较高。亡率较高。3、季节性和地区性均不明显,中毒食品、季节性和地区性均不明显,中毒食品无特异性,多为误食或食入被化学物质无特异性,多为误食或食入被化学物质污染的食品而引起,其偶然性较大。污染的食品而引起,其偶然性较大。化学性食物中毒的特征化学性食物中毒的特征LOGO例:例:保管不当,误食保管不当,误食
5、LOGO化学性食物中毒快速检验化学性食物中毒快速检验定义:是指当发生化学性食物中毒定义:是指当发生化学性食物中毒时,采用一系列快速检测方法进行时,采用一系列快速检测方法进行的毒物定性或半定量分析。的毒物定性或半定量分析。目的:是尽快查明中毒原因,为中目的:是尽快查明中毒原因,为中毒应急处理和救治提供科学依据。毒应急处理和救治提供科学依据。LOGO毒物的分类毒物的分类按毒理学、按毒理学、毒物化学毒物化学分分按按毒物化学毒物化学分:分:挥发性挥发性:氰化物、甲醇、苯酚等:氰化物、甲醇、苯酚等水溶性水溶性:强酸、强碱、亚硝酸盐等:强酸、强碱、亚硝酸盐等金属金属:砷、汞、钡、硒、镉、铬等:砷、汞、钡、
6、硒、镉、铬等不挥发性有机毒物不挥发性有机毒物:催眠药、兴奋剂、:催眠药、兴奋剂、致幻剂、生物碱、强心甙等;致幻剂、生物碱、强心甙等;LOGO毒物的分类毒物的分类按按毒物化学毒物化学分:分:农药和灭鼠药农药和灭鼠药:有机磷、氨基甲酸:有机磷、氨基甲酸酯类,拟除虫菊酯类农药;毒鼠强、酯类,拟除虫菊酯类农药;毒鼠强、氟乙酰胺等灭鼠药;氟乙酰胺等灭鼠药;动植物毒性成分动植物毒性成分:河豚毒素、毒蕈:河豚毒素、毒蕈毒素、桐油酸等。毒素、桐油酸等。LOGO化学性食物中毒快速检验的程序化学性食物中毒快速检验的程序1、了解中毒情况、了解中毒情况v询问:时间、原因、人数、临床症询问:时间、原因、人数、临床症状和
7、体征、用过何种食物、同食者状和体征、用过何种食物、同食者症状、采取的措施和效果症状、采取的措施和效果v初步确定可疑食物、可疑毒物、采初步确定可疑食物、可疑毒物、采样点和方法样点和方法LOGO2、样品采集、样品采集采集原则:部位采集原则:部位取样取样样品种类样品种类采样量:采样量:3倍原则倍原则保存和运输:尽快;低温保存和运输:尽快;低温采样者的自身防护:服装、器具采样者的自身防护:服装、器具化学性食物中毒快速检验的程序化学性食物中毒快速检验的程序样品的分类样品的分类样品样品样品样品0.5Kg500ml0.5Kg500ml0.5Kg500ml检样检样原始样品原始样品平均样品平均样品试验样品试验样
8、品复检样品复检样品保留样品保留样品2-4kg2-4LLOGO3、检验和结论:、检验和结论:定性或半定量检验定性或半定量检验应同时做空白对照和阳性对照应同时做空白对照和阳性对照用两种以上方法确认用两种以上方法确认形态分析形态分析结论为阴性结论为阴性/阳性阳性化学性食物中毒快速检验的程序化学性食物中毒快速检验的程序LOGO试纸法试纸法固体试剂法固体试剂法试管法试管法溶液法溶液法仪器测定法仪器测定法 利用被测毒物的物理化学性利用被测毒物的物理化学性质制成质制成速测卡、速测箱速测卡、速测箱等小型仪器。等小型仪器。待测物与试剂反应待测物与试剂反应生成有色化合物生成有色化合物 比色定性比色定性半定量半定量
9、化学性食物中毒快速检验方法化学性食物中毒快速检验方法LOGO水溶性毒物的快速检验水溶性毒物的快速检验分离提取分离提取1、水浸法、水浸法:捣碎:捣碎/匀质匀质水浸加热水浸加热过滤过滤/离心离心滤液滤液/上清液上清液2、透析法、透析法:无机化合物或小分子有机:无机化合物或小分子有机物可以自由通过半透膜物可以自由通过半透膜LOGO亚硝酸盐的快速检验亚硝酸盐的快速检验主要指亚硝酸钠和亚硝酸钾主要指亚硝酸钠和亚硝酸钾外观和滋味似食盐(且比食盐淡),在外观和滋味似食盐(且比食盐淡),在食品企业,易误食引起中毒食品企业,易误食引起中毒中毒机理:中毒机理:亚硝酸盐能使血液中正常携亚硝酸盐能使血液中正常携氧的低
10、铁氧的低铁血红蛋白血红蛋白氧化成高铁血红蛋白,氧化成高铁血红蛋白,因而失去携氧能力而引起组织缺氧因而失去携氧能力而引起组织缺氧 LOGO亚硝酸盐食物中毒快速检验方法亚硝酸盐食物中毒快速检验方法格氏法格氏法原理:样品经沉淀蛋白质、除去脂肪原理:样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后,在后,在弱酸条件下弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基亚硝酸盐与对氨基苯磺酸苯磺酸重氮化重氮化后,再与后,再与N1萘基乙萘基乙二胺偶合形成二胺偶合形成紫红色染料紫红色染料,与标准比,与标准比较定量。较定量。格氏试剂格氏试剂将所用试剂按比例混合将所用试剂按比例混合配成的粉状试剂配成的粉状试剂LOGO联苯胺联苯胺-冰乙酸法冰乙酸法原理:利用
11、亚硝酸盐在酸性溶液原理:利用亚硝酸盐在酸性溶液中将联苯胺重氮化,然后水解并中将联苯胺重氮化,然后水解并氧化成红色的联苯醌,在白色点氧化成红色的联苯醌,在白色点滴板上进行颜色反应,观察有无滴板上进行颜色反应,观察有无紫红色产生,以检验亚硝酸盐的紫红色产生,以检验亚硝酸盐的存在。存在。亚硝酸盐食物中毒快速检验方法亚硝酸盐食物中毒快速检验方法LOGO 挥发性毒物的快速检测挥发性毒物的快速检测挥发性毒物的分离挥发性毒物的分离v沸点低、蒸汽压高的沸点低、蒸汽压高的 蒸馏法蒸馏法/扩散扩散 法法/顶空法顶空法v沸点高、难溶于水的沸点高、难溶于水的 水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法LOGO氰化物的快速检验氰化物的快
12、速检验氢氰酸、氢氰酸、氰化钾氰化钾和和氰化钠氰化钠等等氰化物的采样:应加碱固定后氰化物的采样:应加碱固定后密封,并尽快测定(氢氰酸易密封,并尽快测定(氢氰酸易水解和与醛反应水解和与醛反应P213)苦味酸试纸法苦味酸试纸法普鲁士蓝法普鲁士蓝法对硝基苯甲醛法对硝基苯甲醛法快速检验法快速检验法苦味酸试纸法苦味酸试纸法q原理:氰化物遇酸产生氢氰酸,原理:氰化物遇酸产生氢氰酸,氢氰酸与苦味酸在弱碱条件下作氢氰酸与苦味酸在弱碱条件下作用生成用生成红色异氰紫酸钠红色异氰紫酸钠。q干扰物:硫化物、亚硫酸盐、硫干扰物:硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐代硫酸盐LOGO原理:氰离子在原理:氰离子在碱性碱性条件下,与条件
13、下,与硫酸亚铁硫酸亚铁作用,生成亚铁氰络盐,酸化后与高铁作用,生成亚铁氰络盐,酸化后与高铁离子反应生成离子反应生成蓝色的蓝色的普鲁士蓝普鲁士蓝。CN-H+HCN5HCN+6NaOH+FeSO4Na4Fe(CN)6+6H2O+Na2SO43Fe(CN)64-+4Fe3+Fe4Fe(CN)63普鲁士蓝法普鲁士蓝法对硝基苯甲醛法对硝基苯甲醛法q原理:氰根离子催化对原理:氰根离子催化对-硝基苯甲醛硝基苯甲醛缩合反应,生成缩合反应,生成4,4-二硝基安息香,二硝基安息香,该物质在碱性条件下生成该物质在碱性条件下生成4,4-硝基硝基安息香红色醌式化合物。安息香红色醌式化合物。q注意:灵敏度高,易产生假阳性
14、,注意:灵敏度高,易产生假阳性,应结合空白试验和其他检验方法来判应结合空白试验和其他检验方法来判断结果。断结果。LOGO 不挥发性有机毒物的快速检验不挥发性有机毒物的快速检验不挥发性有机毒物按其性质可分为不挥发性有机毒物按其性质可分为酸性有机毒物:巴比妥类安眠药酸性有机毒物:巴比妥类安眠药碱性有机毒物:马钱子碱、阿托品等碱性有机毒物:马钱子碱、阿托品等两性有机毒物:吗啡两性有机毒物:吗啡中性有机毒物:难溶于水而溶于有机中性有机毒物:难溶于水而溶于有机 溶剂,如安眠酮、眠尔通等。溶剂,如安眠酮、眠尔通等。LOGO不挥发性有机毒物的分离提取不挥发性有机毒物的分离提取 斯斯-奥氏法:适用于各类不挥发
15、奥氏法:适用于各类不挥发性有机毒物的分离提取。性有机毒物的分离提取。使用条件:当分析目标不够明确,使用条件:当分析目标不够明确,或疑有多种理化性质不同的毒物或疑有多种理化性质不同的毒物存在。存在。斯斯-奥氏法原理奥氏法原理q样品酸化后用乙醇浸泡,各类不挥发性毒物样品酸化后用乙醇浸泡,各类不挥发性毒物均能溶于酸性乙醇,而纤维素,脂肪,蛋白均能溶于酸性乙醇,而纤维素,脂肪,蛋白质,淀粉,糖类及无机物等杂质基本上不溶质,淀粉,糖类及无机物等杂质基本上不溶于酸性乙醇,将上步提取物再用无水乙醇处于酸性乙醇,将上步提取物再用无水乙醇处理几次,杂质基本被除去。理几次,杂质基本被除去。q基本除去杂质的提取物残
16、渣加水溶解,由于基本除去杂质的提取物残渣加水溶解,由于水溶液为呈弱酸性,碱性、两性、酸性和中水溶液为呈弱酸性,碱性、两性、酸性和中性的有机毒物均溶于弱酸性水中,用有机溶性的有机毒物均溶于弱酸性水中,用有机溶剂提取出酸性和中性。剂提取出酸性和中性。q水溶液再变为碱性,有机溶剂将碱性有机物水溶液再变为碱性,有机溶剂将碱性有机物提取出,再控制水溶液的提取出,再控制水溶液的pH范围,两性有范围,两性有机物被提取出来。机物被提取出来。LOGO原理及步骤原理及步骤酸性乙醇提取使不挥发性毒物溶入乙醇中,酸性乙醇提取使不挥发性毒物溶入乙醇中,而而“杂质杂质”不溶。不溶。无水乙醇处理,进一步去除无水乙醇处理,进
17、一步去除“杂质杂质”,挥,挥干乙醇,残渣加水溶解,得弱酸性水溶液。干乙醇,残渣加水溶解,得弱酸性水溶液。用乙醚从弱酸性水溶液中提出酸性和中性用乙醚从弱酸性水溶液中提出酸性和中性有机毒物有机毒物酸性和中性毒物的乙醚溶液酸性和中性毒物的乙醚溶液碱性和两性的弱酸水溶液碱性和两性的弱酸水溶液LOGO提取碱性有机毒物:经乙醚提后的提取碱性有机毒物:经乙醚提后的“3”水溶液,用水溶液,用5%NaOH碱化、乙碱化、乙醚或氯仿萃取醚或氯仿萃取提两性有机毒物:将提两性有机毒物:将“4”提取碱性提取碱性毒物后的水溶液,用毒物后的水溶液,用10%盐酸中和盐酸中和后,再调后,再调pH至至88.5,加氯仿,加氯仿-乙醇
18、乙醇萃取,两性毒物进入氯仿层萃取,两性毒物进入氯仿层原理及步骤原理及步骤碱性和两性的弱酸水溶液碱性和两性的弱酸水溶液LOGO将将“3”步提取的有机溶液,用步提取的有机溶液,用5%NaOH提两次,酸性有机毒物进入提两次,酸性有机毒物进入碱液,中性毒物在有机相中碱液,中性毒物在有机相中将碱性水溶液酸化,有机溶剂提出酸性将碱性水溶液酸化,有机溶剂提出酸性毒物毒物原理及步骤原理及步骤酸性和中性毒物的乙醚溶液酸性和中性毒物的乙醚溶液LOGO简易提取法(简易提取法(P215)适宜于含杂质少的样品提取适宜于含杂质少的样品提取食食物物样样品品乙酸酸化乙酸酸化乙醚提取乙醚提取醚层醚层(酸性和(酸性和中性有机中性
19、有机毒物)毒物)水层水层加氢氧化钠乙醚提取醚层醚层(碱性(碱性有机毒有机毒物)物)水层水层 加盐酸中和后加氨水至弱碱性用三氯甲烷-乙醇(9+1)提取三氯甲烷三氯甲烷层(两性层(两性有机毒物)有机毒物)乙醇乙醇-水层水层(弃去)(弃去)LOGO 包括巴比妥、苯巴比妥等包括巴比妥、苯巴比妥等毒性:对中枢神经系统的抑制作用,抑制延毒性:对中枢神经系统的抑制作用,抑制延脑的呼吸中枢及血管运动中枢脑的呼吸中枢及血管运动中枢中毒症状:尸体皮肤呈青紫色,唇、颜面、中毒症状:尸体皮肤呈青紫色,唇、颜面、指甲呈淡蓝色,尸斑明显,各脏器充血,肺指甲呈淡蓝色,尸斑明显,各脏器充血,肺水肿等。水肿等。巴比妥类安眠药的
20、快速检验巴比妥类安眠药的快速检验硝酸钴法硝酸钴法薄层色谱法薄层色谱法检验方法检验方法LOGO硝酸钴法硝酸钴法v巴比妥类药物在在碱性溶液中可与钴盐巴比妥类药物在在碱性溶液中可与钴盐应,生成紫堇色配位化合物,可用于本应,生成紫堇色配位化合物,可用于本类药物的鉴别和含量测定类药物的鉴别和含量测定v样品在酸性介质中以有机溶剂提取,挥样品在酸性介质中以有机溶剂提取,挥干溶剂,加入硝酸钴的无水乙醇溶液,干溶剂,加入硝酸钴的无水乙醇溶液,再挥干,放在氨水瓶口熏,如出现紫堇再挥干,放在氨水瓶口熏,如出现紫堇色为阳性,如为绿色或黄绿色则为阴性。色为阳性,如为绿色或黄绿色则为阴性。LOGO薄层色谱法薄层色谱法由于
21、巴比妥类安眠药互相间存在由于巴比妥类安眠药互相间存在结构的差异,所以,在薄层色谱结构的差异,所以,在薄层色谱中,用硝酸汞(或硫酸汞)和二中,用硝酸汞(或硫酸汞)和二苯卡巴腙醇溶液作显色剂显色后,苯卡巴腙醇溶液作显色剂显色后,与标准比较,以斑点的颜色和与标准比较,以斑点的颜色和Rf值定性。值定性。LOGO生物碱类的快速检验生物碱类的快速检验v大多数生物碱均几乎不溶或难溶于水大多数生物碱均几乎不溶或难溶于水v能溶于能溶于氯仿氯仿、乙醚乙醚、酒精酒精、丙酮丙酮、苯苯等等有机溶剂有机溶剂v能溶于稀酸的的水溶液而成盐类能溶于稀酸的的水溶液而成盐类v生物碱的盐类大多溶于水生物碱的盐类大多溶于水v常见的生物
22、碱有马钱子碱、阿托品、吗常见的生物碱有马钱子碱、阿托品、吗啡等。啡等。LOGO与生物碱沉淀剂生成难溶于水的有色沉淀与生物碱沉淀剂生成难溶于水的有色沉淀常用生物碱沉淀剂常用生物碱沉淀剂常见生物碱的沉淀反应见书常见生物碱的沉淀反应见书P216,表,表13-1酸类酸类苦味酸苦味酸磷钨酸磷钨酸磷钼酸磷钼酸金属与碘的配合物金属与碘的配合物碘化汞钾碘化汞钾K2HgI4碘化铋钾碘化铋钾BiI34KI碘碘-碘化钾碘化钾I-KI生物碱类的快速检验生物碱类的快速检验沉淀反应沉淀反应LOGOv注意:注意:1.反应为阴性时,可以否定生物碱的存在;反应为阴性时,可以否定生物碱的存在;为阳性则不能完全肯定是生物碱为阳性则
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